Técnica molecular para la detección de Herpesvirus en productos de aborto equino

La tasa global de pérdidas gestacionales en la población de caballos en Argentina varía de 5 a5%, dependiendo del período en que ocurra la pérdida gestacional hablamos de muerte embrionaria, aborto o mortinato. El aborto viral equino o rinoneumonitis equina, es una de las enfermedades de distribu...

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Autores principales: Solari, F. I., Montesi, Alicia Mónica, Maruñak, Silvana Licia, Almirón, Enrique Celso, Jastrzebski, Fernando Alberto, De Biasio, María Bárbara
Formato: Reunión
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias 2024
Materias:
Acceso en línea:http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/55861
Aporte de:
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spelling I48-R184-123456789-558612025-02-11T10:45:23Z Técnica molecular para la detección de Herpesvirus en productos de aborto equino Solari, F. I. Montesi, Alicia Mónica Maruñak, Silvana Licia Almirón, Enrique Celso Jastrzebski, Fernando Alberto De Biasio, María Bárbara Detección Genoma Herpesvirus La tasa global de pérdidas gestacionales en la población de caballos en Argentina varía de 5 a5%, dependiendo del período en que ocurra la pérdida gestacional hablamos de muerte embrionaria, aborto o mortinato. El aborto viral equino o rinoneumonitis equina, es una de las enfermedades de distribución mundial más graves que pueden padecer los equinos; la enfermedad es causada por los Herpesvirus equinos tipos y (HVE-y HVE-). Ambos virus son potenciales factores de riesgo de enfermedad para caballos de todas las edades y categorías, especialmente para los potros. HVE se disemina rápidamente y requiere intervención inmediata. La identificación temprana del agente es necesaria para la rápida ejecución de medidas de control apropiadas, prevenir o detener un brote, e implementar un tratamiento del caballo infestado para reducir la posibilidad de complicaciones causadas por infecciones secundarias. El objetivo del trabajo es la detección de genoma de herpes virus equino utilizando la reacción en cadena de la polimerasa seminested (PCRsn). Se procesaron8 muestras correspondientes a0 casos clínicos, 6 de las cuales fueron tejidos fetales (placenta, riñón, hígado y pulmón) y muestras de hisopado de útero, utilizados para la extracción de ADN. Dos reacciones de amplificación sucesivas fueron llevadas a cabo en un volumen final de5μl y conteniendo:X de Buffer de PCR,,5mM MgCl,,0μM de cada oligonucleótido cebador (HVE-Fw/ HVE-Rew para la primer ronda de amplificación y HVE-Fw/ HVE-Rn para la segunda ronda de amplificación); 00μM de una mezcla equimolecular de dNTPs, 0,5U de Taq ADN polimerasa. Se utilizó un control positivo de PCR consistentes en ADN de HVE-cedidos gentilmente por el Instituto de Virología Equina del INTA Castelar y un control negativo consistente en agua destilada. Las condiciones térmicas para la amplificación fueron: desnaturalización inicial: 95°C por 5min, luego5 ciclos de desnaturalización a 95°C por0seg; pegado de primer: 60°C por 0seg; extensión: 7°C por 60seg; extensión final: 7°C pormin; incubación: oC hasta su utilización. Los tamaños de los productos de amplificación de la primera y segunda ronda fueron fragmentos de 509 ypb, éstos fueron separados y visualizados por electroforesis en gel de agarosa%, teñidos con bromuro de etidio y observados por transiluminación UV. Como resultado obtuvimos casos clínicos detectables para HVE- , uno para las muestras de riñón e hígado y el otro solo en hígado, ambos casos mostraron bandas de amplificación específica luego de realizar la segunda ronda de amplificación. Este estudio demuestra la ventaja del uso de Nested PCR en cuanto a la sensibilidad, ya que se utiliza una porción más pequeña de la muestra para obtener una amplificación específica y eficiente. 2024-10-14T13:06:20Z 2024-10-14T13:06:20Z 2023-11-03 Reunión Solari, F. I., et al., 2023. Técnica molecular para la detección de Herpesvirus en productos de aborto equino. En: XLIII Sesión de Comunicaciones Científicas 2023. Corrientes: Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias, p. 1-1. 2451-6732 http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/55861 spa openAccess http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/ application/pdf p. 1-1 application/pdf Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias
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