Evaluación del poder neutralizante de suero anti fosfodiesterasa (PDE) crotálica
Los accidentes ofídicos representan un importante problema de salud pública en las zonas tropicales y subtropicales del mundo. Cada año, más de 2,5 millones de personas son mordidas por serpientes venenosas resultando en alrededor de 120.000 muertes. El nordeste argentino es un área geográfica de...
Guardado en:
| Autor principal: | |
|---|---|
| Otros Autores: | |
| Formato: | Trabajo final de grado |
| Lenguaje: | Español |
| Publicado: |
Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agrimensura
2022
|
| Materias: | |
| Acceso en línea: | http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/33825 |
| Aporte de: |
| id |
I48-R184-123456789-33825 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| institution |
Universidad Nacional del Nordeste |
| institution_str |
I-48 |
| repository_str |
R-184 |
| collection |
RIUNNE - Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE) |
| language |
Español |
| topic |
Suero anti fosfodiesterasa Crotálica Serpientes Ofidismo Fosfodiesterasa |
| spellingShingle |
Suero anti fosfodiesterasa Crotálica Serpientes Ofidismo Fosfodiesterasa Alonso, María del Rosario Evaluación del poder neutralizante de suero anti fosfodiesterasa (PDE) crotálica |
| topic_facet |
Suero anti fosfodiesterasa Crotálica Serpientes Ofidismo Fosfodiesterasa |
| description |
Los accidentes ofídicos representan un importante problema de salud pública en las zonas
tropicales y subtropicales del mundo. Cada año, más de 2,5 millones de personas son mordidas por
serpientes venenosas resultando en alrededor de 120.000 muertes. El nordeste argentino es un área
geográfica destacada por la presencia de serpientes, dado el clima subtropical que la caracteriza, y
por ende de accidentes ofídicos, afectando principalmente a poblaciones marginales y de bajos
recursos. El veneno de Crotalus durissus terrificus (C. d. terrificus), serpiente conocida como cascabel
sudamericana, posee actividades neurotóxicas, miotóxicas y produce un edema discreto. Son
diversas las sustancias tóxicas que componen este veneno: fosfolipasas del tipo A2 (PLA2s)
(componentes mayoritarios), serinoproteinasas con actividad thrombin-like (TLE), ecto-5′-
nucleotidasas, metaloproteinasas, glutaminil ciclasas y fosfodiesterasas (PDEs); encontrándose estas
últimas en muy baja concentración en el veneno (menos del 2%). La mayoría de los trabajos
realizados están centrados en el estudio del efecto neurotóxico o miotóxico, ya sea del veneno
entero, o de los componentes responsables de causar estas alteraciones, crotoxina (CTX) o PLA2,
respectivamente. Menos atención, sin embargo, ha recibido las restantes propiedades farmacológicas
de sus componentes y en particular, las producidas por las PDEs. A partir de los antecedentes sobre
el tema y el interés en abordar un mejor conocimiento de estas enzimas, se propuso la obtención de
anticuerpos contra una enzima PDE purificada del veneno de C. d. terrificus y la evaluación de su
capacidad neutralizante. Asimismo, utilizar los anticuerpos anti CDT-PDE como herramienta para
detectar la presencia de PDEs en venenos botrópicos de importancia sanitaria en el nordeste
argentino. Para llevar a cabo esta propuesta, se purificó la enzima PDE del veneno por dos pasos
cromatográficos: exclusión molecular (Sephadex G-75) seguida de intercambio iónico (Q-FF, FPLC) y
se la nombró CDT-PDE. Se recolectaron las fracciones de interés, se caracterizaron y se usaron
como antígenos. Grupos de 5 ratones (BALB/c) se inmunizaron por vía subcutánea los días 0, 15 y 30
con CDT-PDE emulsionada con adyuvante de Freund (completo e incompleto, posteriormente). Las
dosis seleccionadas fueron dosis crecientes: 0.3, 0.6 y 1.2 g respectivamente. Un grupo control de 4
ratones, fue inmunizado reemplazando la proteína ofídica por tampón de fosfatos salino (PBS). Se
recogieron muestras de sangre sin anticoagulante de la punta de la cola de los animales los días 14,
29, 41 y 50, al finalizar el plan de inmunización. El suero obtenido fue destinado a realizar ensayos de
ELISA con el fin de evaluar la respuesta inmune de los animales, obteniéndose un título de 1/1600. A
partir del suero se purificaron los anticuerpos por cromatografía de afinidad (Hi Trap Protein G HP),
nombrados anti CDT-PDE. Se realizaron pruebas de neutralización para evaluar la capacidad
bloqueante de los anticuerpos de la actividad PDE de la enzima pura (159 μg), observándose
neutralización parcial de la misma (58 %). Adicionalmente, se utilizó el ensayo de Dot-Blot para
evaluar la reactividad cruzada del suero anti CDT-PDE con dos venenos botrópicos de importancia
sanitaria en la región nordeste de Argentina (Bothrops alternatus y Bothrops diporus). Los resultados
mostraron una reacción cruzada indicando un grado de similitud estructural entre las PDEs de los
venenos crotálicos y botrópicos. |
| author2 |
Fusco, Luciano Sebastián |
| author_facet |
Fusco, Luciano Sebastián Alonso, María del Rosario |
| format |
Trabajo final de grado |
| author |
Alonso, María del Rosario |
| author_sort |
Alonso, María del Rosario |
| title |
Evaluación del poder neutralizante de suero anti fosfodiesterasa (PDE) crotálica |
| title_short |
Evaluación del poder neutralizante de suero anti fosfodiesterasa (PDE) crotálica |
| title_full |
Evaluación del poder neutralizante de suero anti fosfodiesterasa (PDE) crotálica |
| title_fullStr |
Evaluación del poder neutralizante de suero anti fosfodiesterasa (PDE) crotálica |
| title_full_unstemmed |
Evaluación del poder neutralizante de suero anti fosfodiesterasa (PDE) crotálica |
| title_sort |
evaluación del poder neutralizante de suero anti fosfodiesterasa (pde) crotálica |
| publisher |
Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agrimensura |
| publishDate |
2022 |
| url |
http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/33825 |
| work_keys_str_mv |
AT alonsomariadelrosario evaluaciondelpoderneutralizantedesueroantifosfodiesterasapdecrotalica |
| bdutipo_str |
Repositorios |
| _version_ |
1764820540011315202 |