Reconocimiento del ADN bacteriano extracelular por neutrófilos humanos : su impacto en la respuesta a biofilms

Previamente demostramos que el ADN bacteriano extracelular activa a los neutrófilos a través de un mecanismo diferente al canónico CpG-dependiente. El ADN extracelular es un componente central en la formación y estructura de los biofilms bacterianos, comunidades responsables de más del 60% de las in...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor principal: Fuxman Bass, Juan Ignacio
Formato: Tesis Doctoral
Lenguaje:Español
Publicado: 2010
Materias:
Acceso en línea:https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4797_FuxmanBass
Aporte de:
id todo:tesis_n4797_FuxmanBass
record_format dspace
institution Universidad de Buenos Aires
institution_str I-28
repository_str R-134
collection Biblioteca Digital - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA)
language Español
orig_language_str_mv Español
topic ADN BACTERIANO
BIOFILM
INFLAMACION
NEUTROFILOS
P. AERUGINOSA
BACTERIAL DNA
BIOFILM
INFLAMMATION
NEUTROPHILS
P. AERUGINOSA
spellingShingle ADN BACTERIANO
BIOFILM
INFLAMACION
NEUTROFILOS
P. AERUGINOSA
BACTERIAL DNA
BIOFILM
INFLAMMATION
NEUTROPHILS
P. AERUGINOSA
Fuxman Bass, Juan Ignacio
Reconocimiento del ADN bacteriano extracelular por neutrófilos humanos : su impacto en la respuesta a biofilms
topic_facet ADN BACTERIANO
BIOFILM
INFLAMACION
NEUTROFILOS
P. AERUGINOSA
BACTERIAL DNA
BIOFILM
INFLAMMATION
NEUTROPHILS
P. AERUGINOSA
description Previamente demostramos que el ADN bacteriano extracelular activa a los neutrófilos a través de un mecanismo diferente al canónico CpG-dependiente. El ADN extracelular es un componente central en la formación y estructura de los biofilms bacterianos, comunidades responsables de más del 60% de las infecciones ocasionadas por estos microorganismos. La presente tesis tuvo como objetivos centrales determinar el impacto del ADN de la matriz de los biofilms en la activación de los neutrófilos humanos y la identificaron del receptor involucrado en el reconocimiento de ADN. Los estudios realizados indicaron que la degradación con DNAsa I del ADN de la matriz extracelular de los biofilms de P. aeruginosa redujo marcadamente su capacidad de inducir la activación de los neutrófilos, determinada en función de su habilidad para producir citoquinas proinflamatorias, incrementar marcadores de activación fisiológicamente relevantes, de mediar la fagocitosis y de liberar trampas extracelulares de los neutrófilos (NET). La aplicación de técnicas de MALDI-TOF nos permitió identificar, en el neutrófilo, 16 proteínas con capacidad de unir ADN bacteriano. A pesar de que ninguna de ellas resultó ser el receptor de la superficie celular para ADN, es posible que dos de las proteínas encontradas constituyan sensores intracelulares de ADN, cuya relevancia queda por ser explorada. Los hallazgos realizados en la presente Tesis confirman la existencia de una proteína de la superficie del neutrófilo capaz de mediar el reconocimiento de ADN y la activación celular por esta molécula. Además, indican que el ADN de la matriz extracelular representa un componente proinflamatorio relevante de los biofilms de P. aeruginosa. Los mismos permiten especular que el reconocimiento del ADN de la matriz de biofilms podría representar un mecanismo seleccionado evolutivamente para permitir al huésped incrementar su capacidad de responder a este tipo de infecciones bacterianas persistentes
format Tesis Doctoral
author Fuxman Bass, Juan Ignacio
author_facet Fuxman Bass, Juan Ignacio
author_sort Fuxman Bass, Juan Ignacio
title Reconocimiento del ADN bacteriano extracelular por neutrófilos humanos : su impacto en la respuesta a biofilms
title_short Reconocimiento del ADN bacteriano extracelular por neutrófilos humanos : su impacto en la respuesta a biofilms
title_full Reconocimiento del ADN bacteriano extracelular por neutrófilos humanos : su impacto en la respuesta a biofilms
title_fullStr Reconocimiento del ADN bacteriano extracelular por neutrófilos humanos : su impacto en la respuesta a biofilms
title_full_unstemmed Reconocimiento del ADN bacteriano extracelular por neutrófilos humanos : su impacto en la respuesta a biofilms
title_sort reconocimiento del adn bacteriano extracelular por neutrófilos humanos : su impacto en la respuesta a biofilms
publishDate 2010
url https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4797_FuxmanBass
work_keys_str_mv AT fuxmanbassjuanignacio reconocimientodeladnbacterianoextracelularporneutrofiloshumanossuimpactoenlarespuestaabiofilms
AT fuxmanbassjuanignacio extracellularbacterialdnarecognitionbyhumanneutrophilsitsimpactontheresponsetobiofilms
_version_ 1807315302172590080
spelling todo:tesis_n4797_FuxmanBass2023-10-03T12:50:39Z Reconocimiento del ADN bacteriano extracelular por neutrófilos humanos : su impacto en la respuesta a biofilms Extracellular bacterial DNA recognition by human neutrophils: it´s impact on the response to biofilms Fuxman Bass, Juan Ignacio ADN BACTERIANO BIOFILM INFLAMACION NEUTROFILOS P. AERUGINOSA BACTERIAL DNA BIOFILM INFLAMMATION NEUTROPHILS P. AERUGINOSA Previamente demostramos que el ADN bacteriano extracelular activa a los neutrófilos a través de un mecanismo diferente al canónico CpG-dependiente. El ADN extracelular es un componente central en la formación y estructura de los biofilms bacterianos, comunidades responsables de más del 60% de las infecciones ocasionadas por estos microorganismos. La presente tesis tuvo como objetivos centrales determinar el impacto del ADN de la matriz de los biofilms en la activación de los neutrófilos humanos y la identificaron del receptor involucrado en el reconocimiento de ADN. Los estudios realizados indicaron que la degradación con DNAsa I del ADN de la matriz extracelular de los biofilms de P. aeruginosa redujo marcadamente su capacidad de inducir la activación de los neutrófilos, determinada en función de su habilidad para producir citoquinas proinflamatorias, incrementar marcadores de activación fisiológicamente relevantes, de mediar la fagocitosis y de liberar trampas extracelulares de los neutrófilos (NET). La aplicación de técnicas de MALDI-TOF nos permitió identificar, en el neutrófilo, 16 proteínas con capacidad de unir ADN bacteriano. A pesar de que ninguna de ellas resultó ser el receptor de la superficie celular para ADN, es posible que dos de las proteínas encontradas constituyan sensores intracelulares de ADN, cuya relevancia queda por ser explorada. Los hallazgos realizados en la presente Tesis confirman la existencia de una proteína de la superficie del neutrófilo capaz de mediar el reconocimiento de ADN y la activación celular por esta molécula. Además, indican que el ADN de la matriz extracelular representa un componente proinflamatorio relevante de los biofilms de P. aeruginosa. Los mismos permiten especular que el reconocimiento del ADN de la matriz de biofilms podría representar un mecanismo seleccionado evolutivamente para permitir al huésped incrementar su capacidad de responder a este tipo de infecciones bacterianas persistentes We have previously demonstrated that extracellular bacterial DNA activates neutrophils through a non-canonical mechanism. Extracelular DNA is a key component in the formation and composition of bacterial biofilms, that are communities responsible for more than 60% of the infections caused by these microorganisms. The aims of this Thesis were to determine the impact of DNA present in the biofilm matrix in triggering human neutrophil activation and to identify the receptor involved in DNA recognition. We found that extracelluar DNA degradation of P. aeruginosa biofilm matrix with DNase I markedly reduced its ability to induce neutrophil activation, determined by evaluating proinflammatoy cytokines production, the increase of physiologically relevant activation markers, phagocytosis and neutrophil extracelullar traps (NET) release. By application of MALDI-TOF techniques we identified 16 neutrophil proteins that bind bacterial DNA. Although none of them proved to be the DNA surface receptor, it is possible that two of these proteins correspond to intracellular DNA sensors whose relevance remains to be explored. The findings presented in this Thesis confirm the existence of a neutrophil surface protein capable of mediating DNA recognition and cell activation. Additionaly, they indicate that extracellular matrix DNA represents a relevant proinflammatory component of P. aeruginosa biofilms. Thus, it is possible to speculate that recognition of extracellular DNA of the biofilm matrix represents an evolutionary selected mechanism that increases the ability of the host to respond to these types of persistent bacterial infections. Fil: Fuxman Bass, Juan Ignacio. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. 2010 Tesis Doctoral PDF Español info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4797_FuxmanBass