Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli

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La glucógeno sintetasa (GS) de Escherichia coli es una glicosiltransferasa que transfiereglucosas desde la ADP-glucosa (ADP-Glc) hacia el extremo no reductor del glucógeno,reteniendo la configuración anomérica. En el presente trabajo, se identificó mediante técnicasde modificación química y mutagéne...

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Detalles Bibliográficos
Autor principal: Yep Rodríguez, Alejandra
Formato: Tesis Doctoral
Lenguaje:Español
Publicado: 2004
Materias:
GLUCOGENO
GLUCOGENO SINTETASA
GLGA
GLICOSILTRANSFERASA
ALMIDON
GT-B
GLYCOGEN
GLYCOGEN SYNTHASE
GLYCOSYLTRANSFERASE
STARCH
Acceso en línea:https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3769_YepRodriguez
Aporte de:
Biblioteca Digital - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA) de Universidad de Buenos Aires
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spelling todo:tesis_n3769_YepRodriguez2023-10-03T12:43:31Z Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli Structure-function relationships in the Escherichia coli glycogen synthase Yep Rodríguez, Alejandra GLUCOGENO GLUCOGENO SINTETASA GLGA GLICOSILTRANSFERASA ALMIDON GT-B GLYCOGEN GLYCOGEN SYNTHASE GLGA GLYCOSYLTRANSFERASE STARCH GT-B La glucógeno sintetasa (GS) de Escherichia coli es una glicosiltransferasa que transfiereglucosas desde la ADP-glucosa (ADP-Glc) hacia el extremo no reductor del glucógeno,reteniendo la configuración anomérica. En el presente trabajo, se identificó mediante técnicasde modificación química y mutagénesis sitio-dirigida una zona conservada entre las GSbacterianas y almidón sintetasas involucrada en catálisis y unión de sustratos. Posteriormente,se generó un modelo de homología de la GS de E. coli basándose en la estructura deotras tres glicosiltransferasas con un mismo tipo de fold GT-B. La comparación entre las estructurasde las glicosiltransferasas cristalizadas y el modelo de homología llevó a la identificaciónde un grupo de residuos conservados compartiendo una misma topología. Las mutaciones E377A, D137A, R3OOA,K305A y H161A disminuyeron la actividad específica 10000, 8100, 2600, 1200 y 710 veces, respectivamente. Ninguna de las mutaciones aumentóel S0.5; para el glucógeno, y sólo H161A y R300A mostraron S0.5; aumentados para la ADP-Glc en ll y 8 veces, respectivamente. Estos residuos resultaron esenciales para lacatálisis enzimática, validando el modelo que muestra una importante similitud en el sitioactivo de GS de E. coli y otras glicosiltransferasas con un fold GT-B cristalizadas hasta lafecha. Asimismo, se identificaron con técnicas de modelado y se estudiaron otros residuosconservados que tienen una participación potencial en la unión de la ADP-Glc y elglucógeno. Esta es la primera vez que se estudia detalladamente el sitio activo de una GSbacteriana. Fil: Yep Rodríguez, Alejandra. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. 2004 Tesis Doctoral PDF Español info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3769_YepRodriguez
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