Una nueva actividad citolítica en Antozoos : caracterización y significado biológico
En esta Tesis se presentan dos aspectos de la biología de los celenterados. Por un lado,se describe el hallazgo y la caracterización de la celenterolisina, una potente toxinacitolítica encontrada en el celenterón del antozoo Phymactis clematis. Por otro lado. sepresenta la elucidación del mecanismo...
Guardado en:
Autor principal: | |
---|---|
Formato: | Tesis Doctoral |
Lenguaje: | Español |
Publicado: |
1995
|
Acceso en línea: | https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2761_Meinardi |
Aporte de: |
id |
todo:tesis_n2761_Meinardi |
---|---|
record_format |
dspace |
spelling |
todo:tesis_n2761_Meinardi2023-10-03T12:32:49Z Una nueva actividad citolítica en Antozoos : caracterización y significado biológico Meinardi, Elsa Noemí En esta Tesis se presentan dos aspectos de la biología de los celenterados. Por un lado,se describe el hallazgo y la caracterización de la celenterolisina, una potente toxinacitolítica encontrada en el celenterón del antozoo Phymactis clematis. Por otro lado. sepresenta la elucidación del mecanismo de autotolerancia de la toxina, es decir, la formaen que la celenterolisina ataca a las células de otros organismos sin afectar los tejidos dela anémona. Se ha determinado que la celenterolisina es de naturaleza peptídica, con un peso molecularaproximado de 18.000. La actividad hemolítica de preparaciones de la misma purificadaspor precipitación con sulfato de amonio, cromatografía de intercambio iónico y de filtraciónen Sephadex G-50, tiene un pH óptimo de 8, es termolábil, no es dependiente de Ca++ nide Mg++, y es fuertemente inhibida por esfingomielina (SM) de diverso origen. La celenterolisina fue comparada con la hemolisina extraída de nematocistos purificados,determinándose que se trata de dos principios hemolíticos diferentes, que poseen ademásuna distinta distribución en las partes del cuerpo de las anémonas. Los estudios del mecanismo de acción de la celenterolisina indicaron que su actividad noes debida a fosfolipasas, esfingomielinasas ni proteasas. El estudio de la hemólisis deglóbulos rojos con distinto contenido de SM indicó una mayor actividad hemolíticaacompañando un mayor contenido de SM. Mediante experimentos en los que se utilizaron liposomas con carboxifluoresceínaencapsulada, se halló que: i) la lisina posee una fuerte actividad lítica sobre los liposomaspreparados con lípidos de eritrocitos bovinos, pero es completamente inactiva contra losliposomas de lípidos extraídos de las anémonas de mar; ii) si pequeñas cantidades de SMbovina (1% m/m) se agregan a los lípidos de la anémona, los correspondientes liposomasadquieren sensibilidad a la lisina, lo que no ocurre si en lugar de SM, se utilizafosfatidilcolina u otros lípidos, señalando un rol crucial para la SM en el proceso. Una notable característica de los celenterados es la particular abundancia en susmembranas de análogosfosfónicos de la esfingomielina (SPnL), principalmente la ceramidaaminoetil fosfonato. Significativamente, estos organismos no poseen la SM usualmentepresente en otros metazoos. El significado de estas particularidades bioquímicas era hastaahora desconocido. En este trabajo, he planteado la hipótesis de que las toxinas líticas y lacomposición lipídica son rasgos coadaptados que permiten a los celenterados destruir otrosorganismos, permaneciendo ellos mismos indemnes. Comprobando categóricamente estahipótesis, se hicieron las siguientes observaciones originales: i) en contraste con la SM, los SPnL no inhiben la hemólisis causada por la celenterolisina; ii) la celenterolisina se une alos liposomas de SM pero no a los liposomas de SPnL. Es decir, estos hallazgosdemuestran que la celenterolisina interactúa en forma muy diferente con estos dos análogoslipídicos casi indistinguibles. De este modo, el trabajo presentado en esta Tesis establece las bases para comprender dequé modo estos organismos pueden contener en sus cavidades gastrocélicas un poderosoagente lítico para otras células, siendo ellos resistentes al mismo. Celenterolisina y SPnLrepresentan así los dos elementos de una adaptación no sospechada hasta el presente. Fil: Meinardi, Elsa Noemí. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. 1995 Tesis Doctoral PDF Español info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2761_Meinardi |
institution |
Universidad de Buenos Aires |
institution_str |
I-28 |
repository_str |
R-134 |
collection |
Biblioteca Digital - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA) |
language |
Español |
orig_language_str_mv |
Español |
description |
En esta Tesis se presentan dos aspectos de la biología de los celenterados. Por un lado,se describe el hallazgo y la caracterización de la celenterolisina, una potente toxinacitolítica encontrada en el celenterón del antozoo Phymactis clematis. Por otro lado. sepresenta la elucidación del mecanismo de autotolerancia de la toxina, es decir, la formaen que la celenterolisina ataca a las células de otros organismos sin afectar los tejidos dela anémona. Se ha determinado que la celenterolisina es de naturaleza peptídica, con un peso molecularaproximado de 18.000. La actividad hemolítica de preparaciones de la misma purificadaspor precipitación con sulfato de amonio, cromatografía de intercambio iónico y de filtraciónen Sephadex G-50, tiene un pH óptimo de 8, es termolábil, no es dependiente de Ca++ nide Mg++, y es fuertemente inhibida por esfingomielina (SM) de diverso origen. La celenterolisina fue comparada con la hemolisina extraída de nematocistos purificados,determinándose que se trata de dos principios hemolíticos diferentes, que poseen ademásuna distinta distribución en las partes del cuerpo de las anémonas. Los estudios del mecanismo de acción de la celenterolisina indicaron que su actividad noes debida a fosfolipasas, esfingomielinasas ni proteasas. El estudio de la hemólisis deglóbulos rojos con distinto contenido de SM indicó una mayor actividad hemolíticaacompañando un mayor contenido de SM. Mediante experimentos en los que se utilizaron liposomas con carboxifluoresceínaencapsulada, se halló que: i) la lisina posee una fuerte actividad lítica sobre los liposomaspreparados con lípidos de eritrocitos bovinos, pero es completamente inactiva contra losliposomas de lípidos extraídos de las anémonas de mar; ii) si pequeñas cantidades de SMbovina (1% m/m) se agregan a los lípidos de la anémona, los correspondientes liposomasadquieren sensibilidad a la lisina, lo que no ocurre si en lugar de SM, se utilizafosfatidilcolina u otros lípidos, señalando un rol crucial para la SM en el proceso. Una notable característica de los celenterados es la particular abundancia en susmembranas de análogosfosfónicos de la esfingomielina (SPnL), principalmente la ceramidaaminoetil fosfonato. Significativamente, estos organismos no poseen la SM usualmentepresente en otros metazoos. El significado de estas particularidades bioquímicas era hastaahora desconocido. En este trabajo, he planteado la hipótesis de que las toxinas líticas y lacomposición lipídica son rasgos coadaptados que permiten a los celenterados destruir otrosorganismos, permaneciendo ellos mismos indemnes. Comprobando categóricamente estahipótesis, se hicieron las siguientes observaciones originales: i) en contraste con la SM, los SPnL no inhiben la hemólisis causada por la celenterolisina; ii) la celenterolisina se une alos liposomas de SM pero no a los liposomas de SPnL. Es decir, estos hallazgosdemuestran que la celenterolisina interactúa en forma muy diferente con estos dos análogoslipídicos casi indistinguibles. De este modo, el trabajo presentado en esta Tesis establece las bases para comprender dequé modo estos organismos pueden contener en sus cavidades gastrocélicas un poderosoagente lítico para otras células, siendo ellos resistentes al mismo. Celenterolisina y SPnLrepresentan así los dos elementos de una adaptación no sospechada hasta el presente. |
format |
Tesis Doctoral |
author |
Meinardi, Elsa Noemí |
spellingShingle |
Meinardi, Elsa Noemí Una nueva actividad citolítica en Antozoos : caracterización y significado biológico |
author_facet |
Meinardi, Elsa Noemí |
author_sort |
Meinardi, Elsa Noemí |
title |
Una nueva actividad citolítica en Antozoos : caracterización y significado biológico |
title_short |
Una nueva actividad citolítica en Antozoos : caracterización y significado biológico |
title_full |
Una nueva actividad citolítica en Antozoos : caracterización y significado biológico |
title_fullStr |
Una nueva actividad citolítica en Antozoos : caracterización y significado biológico |
title_full_unstemmed |
Una nueva actividad citolítica en Antozoos : caracterización y significado biológico |
title_sort |
una nueva actividad citolítica en antozoos : caracterización y significado biológico |
publishDate |
1995 |
url |
https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2761_Meinardi |
work_keys_str_mv |
AT meinardielsanoemi unanuevaactividadcitoliticaenantozooscaracterizacionysignificadobiologico |
_version_ |
1782023516196962304 |