Síntesis de un pentasacárido constituyente de mucinas del core 2 de Trypanosoma cruzi y derivados

Los oligosacáridos con unión -O-glicosídica (via -GlcNAc) a las proteínas conocidas como mucinas en T. cruzi cumplen un importante rol en el proceso de infección. Estas mucinas cubren densamente la superficie del parásito y su estructura depende del estadío y de la cepa. En la ampolla rectal del ins...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor principal: Cori Calizaya, Carmen Rosa
Otros Autores: Gallo, Carola
Formato: Tesis doctoral publishedVersion
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales 2022
Materias:
OLIGOSACARIDOS
TRYPANOSOMA CRUZI
MUCINAS
EPIMASTIGOTE
GLICOSIDACION
TIOGLICOSIDO
TRICLOROACETIMIDATO
ESTRATEGIAS
OLIGOSACCHARIDES
MUCINS
GLYCOSYLATION
THIOGLYCOSIDE
TRICHLOROACETIMIDATE
STRATEGIES
Acceso en línea:https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n7260_CoriCalizaya
Aporte de:
Biblioteca Digital - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA) de Universidad de Buenos Aires
id tesis:tesis_n7260_CoriCalizaya
record_format dspace
institution Universidad de Buenos Aires
institution_str I-28
repository_str R-134
collection Biblioteca Digital - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA)
language Español
orig_language_str_mv spa
topic OLIGOSACARIDOS
TRYPANOSOMA CRUZI
MUCINAS
EPIMASTIGOTE
GLICOSIDACION
TIOGLICOSIDO
TRICLOROACETIMIDATO
ESTRATEGIAS
OLIGOSACCHARIDES
TRYPANOSOMA CRUZI
EPIMASTIGOTE
MUCINS
GLYCOSYLATION
THIOGLYCOSIDE
TRICHLOROACETIMIDATE
STRATEGIES
spellingShingle OLIGOSACARIDOS
TRYPANOSOMA CRUZI
MUCINAS
EPIMASTIGOTE
GLICOSIDACION
TIOGLICOSIDO
TRICLOROACETIMIDATO
ESTRATEGIAS
OLIGOSACCHARIDES
TRYPANOSOMA CRUZI
EPIMASTIGOTE
MUCINS
GLYCOSYLATION
THIOGLYCOSIDE
TRICHLOROACETIMIDATE
STRATEGIES
Cori Calizaya, Carmen Rosa
Síntesis de un pentasacárido constituyente de mucinas del core 2 de Trypanosoma cruzi y derivados
topic_facet OLIGOSACARIDOS
TRYPANOSOMA CRUZI
MUCINAS
EPIMASTIGOTE
GLICOSIDACION
TIOGLICOSIDO
TRICLOROACETIMIDATO
ESTRATEGIAS
OLIGOSACCHARIDES
TRYPANOSOMA CRUZI
EPIMASTIGOTE
MUCINS
GLYCOSYLATION
THIOGLYCOSIDE
TRICHLOROACETIMIDATE
STRATEGIES
description Los oligosacáridos con unión -O-glicosídica (via -GlcNAc) a las proteínas conocidas como mucinas en T. cruzi cumplen un importante rol en el proceso de infección. Estas mucinas cubren densamente la superficie del parásito y su estructura depende del estadío y de la cepa. En la ampolla rectal del insecto vector Triatoma infestans, los parásitos en estadío epimastigote se adhieren y se diferencian a trypomastigotes metaciclícos, altamente infectivos para el hospedador mamífero. En nuestro laboratorio se ha encarado la síntesis química de todos los oligosacáridos derivados del core 2 de las mucinas, que contienen Galf. En este trabajo de Tesis se sintetizó, por primera vez, el pentasacárido β-D-Galf-(1→2)-β-D-Galf-(1→4)-[β-D-Galp-(1→3)-β-D-Galp-(1→6)]-α-D-GlcNAc(I), completando la síntesis de esta familia de compuestos. La síntesis de I se realizó por una estrategia convergente [3+2] mediante dos donores distintos. El método del tricloroacetimidato rindió un pentasacárido precursor impurificado con un derivado del sintón β-D-Galp-(1→3)-β-D-Galp, difícil de separar. En cambio, el disacárido donor tioglicósido dió un pentasacárido derivado puro y con excelente rendimiento. Sin embargo, la construcción del enlace β-D-Galp-(1→3)-D-Galp de dicho donor fue muy dificultosa y requirió un estudio exhaustivo de glicosidación. Además, se sintetizó I por una estrategia secuencial [3+1+1] que, si bien rindió un tetrasacárido novedoso con buen rendimiento, la introducción de la última unidad de Galp en la posición O-3 fue dificultosa. La obtención del pentasacárido alditol permitió confirmar la estructura obtenida de las mucinas por β-eliminación reductiva. Se evaluó el efecto de oligosacáridos constituyentes de mucinas sintetizados por nuestro grupo como -bencil glicósidos, incluidos aquellos recientemente sintetizados en esta Tesis. De los oligosacáridos evaluados, únicamente aquellos que contienen la unidad de trisacárido β-D-Galf(1→4)-[ β-D-Galp(1→6)]-D-GlcNAcα-OBn (II) inhibieron la adhesión de epimastigotes a la cutícula interna del recto de T. infestans, por lo que estarían involucrados en la diferenciación a tripomastigotes metacíclicos.Con el fin de evaluar la importancia de la configuración anomérica de la unidad de GlcNAc en la adhesión, se síntetizó el bencil β-glicósido de II A diferenci a de la síntesis del análogo, la obtención del glicósido III se logró únicamente por una estrategia que consistió en la glicosidación de la posición 4-OH secundaria seguida de la posición 6-OH primaria. Este compuesto inhibió la adhesión de epimastigotes a la cutícula interna del recto, por lo que la configuración anomérica no es determinante de dicho efecto, proveyendo de un mayor conocimiento del receptor involucrado.
author2 Gallo, Carola
author_facet Gallo, Carola
Cori Calizaya, Carmen Rosa
format Tesis doctoral
Tesis doctoral
publishedVersion
author Cori Calizaya, Carmen Rosa
author_sort Cori Calizaya, Carmen Rosa
title Síntesis de un pentasacárido constituyente de mucinas del core 2 de Trypanosoma cruzi y derivados
title_short Síntesis de un pentasacárido constituyente de mucinas del core 2 de Trypanosoma cruzi y derivados
title_full Síntesis de un pentasacárido constituyente de mucinas del core 2 de Trypanosoma cruzi y derivados
title_fullStr Síntesis de un pentasacárido constituyente de mucinas del core 2 de Trypanosoma cruzi y derivados
title_full_unstemmed Síntesis de un pentasacárido constituyente de mucinas del core 2 de Trypanosoma cruzi y derivados
title_sort síntesis de un pentasacárido constituyente de mucinas del core 2 de trypanosoma cruzi y derivados
publisher Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
publishDate 2022
url https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n7260_CoriCalizaya
work_keys_str_mv AT coricalizayacarmenrosa sintesisdeunpentasacaridoconstituyentedemucinasdelcore2detrypanosomacruziyderivados
AT coricalizayacarmenrosa synthesisofapentasaccharideconstituentoftrypanosomacruzicore2mucinsandderivatives
_version_ 1831983311311863808
spelling tesis:tesis_n7260_CoriCalizaya2025-03-31T21:52:39Z Síntesis de un pentasacárido constituyente de mucinas del core 2 de Trypanosoma cruzi y derivados Synthesis of a pentasaccharide constituent of Trypanosoma cruzi core 2 mucins and derivatives Cori Calizaya, Carmen Rosa Gallo, Carola OLIGOSACARIDOS TRYPANOSOMA CRUZI MUCINAS EPIMASTIGOTE GLICOSIDACION TIOGLICOSIDO TRICLOROACETIMIDATO ESTRATEGIAS OLIGOSACCHARIDES TRYPANOSOMA CRUZI EPIMASTIGOTE MUCINS GLYCOSYLATION THIOGLYCOSIDE TRICHLOROACETIMIDATE STRATEGIES Los oligosacáridos con unión -O-glicosídica (via -GlcNAc) a las proteínas conocidas como mucinas en T. cruzi cumplen un importante rol en el proceso de infección. Estas mucinas cubren densamente la superficie del parásito y su estructura depende del estadío y de la cepa. En la ampolla rectal del insecto vector Triatoma infestans, los parásitos en estadío epimastigote se adhieren y se diferencian a trypomastigotes metaciclícos, altamente infectivos para el hospedador mamífero. En nuestro laboratorio se ha encarado la síntesis química de todos los oligosacáridos derivados del core 2 de las mucinas, que contienen Galf. En este trabajo de Tesis se sintetizó, por primera vez, el pentasacárido β-D-Galf-(1→2)-β-D-Galf-(1→4)-[β-D-Galp-(1→3)-β-D-Galp-(1→6)]-α-D-GlcNAc(I), completando la síntesis de esta familia de compuestos. La síntesis de I se realizó por una estrategia convergente [3+2] mediante dos donores distintos. El método del tricloroacetimidato rindió un pentasacárido precursor impurificado con un derivado del sintón β-D-Galp-(1→3)-β-D-Galp, difícil de separar. En cambio, el disacárido donor tioglicósido dió un pentasacárido derivado puro y con excelente rendimiento. Sin embargo, la construcción del enlace β-D-Galp-(1→3)-D-Galp de dicho donor fue muy dificultosa y requirió un estudio exhaustivo de glicosidación. Además, se sintetizó I por una estrategia secuencial [3+1+1] que, si bien rindió un tetrasacárido novedoso con buen rendimiento, la introducción de la última unidad de Galp en la posición O-3 fue dificultosa. La obtención del pentasacárido alditol permitió confirmar la estructura obtenida de las mucinas por β-eliminación reductiva. Se evaluó el efecto de oligosacáridos constituyentes de mucinas sintetizados por nuestro grupo como -bencil glicósidos, incluidos aquellos recientemente sintetizados en esta Tesis. De los oligosacáridos evaluados, únicamente aquellos que contienen la unidad de trisacárido β-D-Galf(1→4)-[ β-D-Galp(1→6)]-D-GlcNAcα-OBn (II) inhibieron la adhesión de epimastigotes a la cutícula interna del recto de T. infestans, por lo que estarían involucrados en la diferenciación a tripomastigotes metacíclicos.Con el fin de evaluar la importancia de la configuración anomérica de la unidad de GlcNAc en la adhesión, se síntetizó el bencil β-glicósido de II A diferenci a de la síntesis del análogo, la obtención del glicósido III se logró únicamente por una estrategia que consistió en la glicosidación de la posición 4-OH secundaria seguida de la posición 6-OH primaria. Este compuesto inhibió la adhesión de epimastigotes a la cutícula interna del recto, por lo que la configuración anomérica no es determinante de dicho efecto, proveyendo de un mayor conocimiento del receptor involucrado. The mucin-like glycoproteins are major components in the surface of Trypanosoma cruzi and play an important role in the infection process. The oligosaccharides in the mucins are α-O-linked to the protein via GlcNAc and its composition is characteristic of each differentiation stage and strain. In the internal cuticle of the rectal ampoule of the insect vector Triatoma infestans, parasites in the epimatigote stage are attached and differentiate into highly infective metacyclic trypomastigotes. In our laboratory, the synthesis of the oligosaccharides of the core 2 family containing D-Galf has been performed. In this Thesis, the pentasaccharide β-D-Galf-(1→2)- β-D-Galf-(1→4)-[β-D-Galp-(1→3)-β-D-Galp-(1→6)]-α-D-GlcNAc (I) was synthesized for the first time by a [3+2] convergent strategy using two different donors: trichloroacetimidate method led to a pentasaccharide precursor impurified with a synthon β-D-Galp-(1→3)-β- D-Galp derivative difficult to isolate. In contrast, the thioglycoside disaccharide donor gave a pure pentasaccharide derivative with excellent yield. However, the construction of the β- D-Galp-(1→3)-D-Galp linkage was very difficult, and it required an exhaustive glycosylation study. Pentasaccharide was also obtained by a sequential strategy [3+1+1] which included the synthesis of a novel tetrasaccharide with excellent yield, but further introduction of last Galp unit in O-3, resulted in moderate yield. The chemical synthesis of pentasaccharide alditol allowed the confirmation of the structure obtained by reductive β-elimination from mucins of Tulahuen strain. Ex vivo binding assays in the presence of chemically synthesized oligosaccharides as α-benzyl glycosides, including those synthesized in this Thesis were performed. Among them, the oligosaccharides containing the trisaccharide structure β-D-Galf(1→4)-[β -D-Galp(1→6)]-D-GlcNAcα-OBn (II) inhibited the adhesion of epimastigotes to the hindgut inner lining of T. infestans, a critical step leading to their differentiation into mammal-infective metacyclic forms. The β-benzyl glycoside of was synthetized with the aim of studying the influence of the anomeric configuration of the GlcNAc unit in the adhesion process. Unlike the synthesis of trisaccharide α-analogue, the β-glycoside was exclusively obtained by the introduction of the Galp unit on secondary OH-4 followed by the Galf unit on primary OH-6. Trisaccharide III inhibited the adhesion of epimastigotes to the inner lining hindgut, showing that the anomeric configuration is not relevant in the adhesion process providing more information about the involved receptor. Fil: Cori Calizaya, Carmen Rosa. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales 2022-12-15 info:eu-repo/semantics/doctoralThesis info:ar-repo/semantics/tesis doctoral info:eu-repo/semantics/publishedVersion application/pdf spa info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n7260_CoriCalizaya

Ejemplares similares