Fisiología y desarrollo de sistemas genéticos en Thiobacillus ferrooxidans y cepas relacionadas para aplicación en procesos biometalúrgicos

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Considerando que existe mayor probabilidad en la expresión de genesentre bacterias relacionadas, se obtuvo una colección de cepasdel género Thiobacillus seleccionadas según los fenotiposasociados a resistencias de tipo enzimático a distintos metalesinhibidores. Entre estas cepas se seleccionaron aqu...

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Detalles Bibliográficos
Autor principal: Paños, Nora Hilda
Otros Autores: Torres, Héctor N.
Formato: Tesis doctoral publishedVersion
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales 1991
Acceso en línea:https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2408_Panos
Aporte de:
Biblioteca Digital - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA) de Universidad de Buenos Aires
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Uno de estosplásmidos fue transferido a una cepa de E. coli, obteniéndose unnotable incremento en las resistencias a los iones metálicos inhibidoresde T. ferrooxidans (Hg²+, Ag+, Cd²+, Te2O3=, A6O2-, y HA6O4=), en asociación con los fenotipos característicos. Estoindicó que el plásmido codifica resistencias múltiples a dichosiones, cuyos genes provienen de una especie de Thiobacillus. Por enriquecimiento y aislamientos a partir de muestras de mineralesnacionales se constituyó un banco de cepas bacterianas queresponden a las caracteristicas de T. ferrooxidans. Se analizó el crecimiento de las cepas así obtenidas, comparandolocon una cepa de colección de T. ferrooxidans en medio ferrosoagarizado, a fin de obtener un método adecuado de plaqueo. Sedescubrió que el principal problema en la obtención de coloniasen corto tiempo, reside en el contenido de agua del medio. Se desarrollótambién un método de obtención de colonias en un medioferroso sin agarizar, constituido por una fina capa de sales depositadassobre el vidrio de una placa. El requerimiento de un alto grado de deshidratación del medio,para el crecimiento rápido de estas bacterias, permite caracterizarlascomo microorganismos Xerofílicos (del griego: amantes delo seco). En vista del corto tiempo requerido para la obtención de coloniasen estas condiciones (24 hs), se determinaron los tiempos de generaciónde las cepas en medio líquido y adheridas al sustratosólido (altamente deshidratado). Se encontró que en medio líquidoel tiempo de generación de distintas cepas oscila entre 7 y 11hs, en tanto que adheridas a un medio sólido deshidratado, oscilaentre 20 y 30 minutos. Estos resultados se analizaron en funciónde la principal barrera técnico-económica de los actuales procesosbiohidrometalúrgicos, caracterizados por una baja velocidadde multiplicación bacteriana. Por microscopía de scanning se analizaron las relaciones microorganismo-producto cristalino, que se establecen durante la colonizaciónbacteriana del sustrato. Se encontró que el producto de laactividad bacteriana en medios deshidratados se encuentra en estadocristalino, y que las bacterias van quedando, al menos temporalmente,ocluídas en el cristal que forman. Por aplicación de las condiciones anteriores, se estudió el crecimientobacteriano y la bio-oxidación de distintos sulfuros metálicossintéticos, concentrados y minerales. Se arribó a conclusiones respecto de las condiciones que independizanel crecimiento bacteriano del nitrógeno amoniacal, sugiriendouna elevada eficiencia en la fijación de nitrógeno, en mediosdeshidratados. Se propone que el cristal en el que las bacteriasvan quedando ocluídas, protege al sistema nitrogenasa deloxigeno. Se analizó la cinética del crecimiento de T. ferrooxidans en funcióndel aumento de la masa proteica y del contenido de agua enel medio, y su correlación con la cinética de bio-oxidación desulfuro cúprico. Se determinó que las cepas de T. ferrooxidans son resistentes alos iones metálicos que resultan inhibidores en medio líquido,cuando el grado de deshidratación de un medio sólido es el requeridopara el desarrollo óptimo de la bacteria. La obtención de plásmidos con múltiples resistencias, provenientesde especies de Thiobacillus y el conocimiento del contenidode agua en un medio sólido, en el cual el T. ferrooxidans es sensiblea los iones metálicos, crean un marco más adecuado paratrabajar en el desarrollo de una metodología de transformaciónpara T. ferrooxidans. Tanto en medios ferrosos como en sulfuros metálicos, se descubrieronfenómenos de translocación bacteriana en superficies, queno habían sido descriptos en estas bacterias y que podrían aplicarsecon fines tecnológicos. Fil: Paños, Nora Hilda. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales 1991 info:eu-repo/semantics/doctoralThesis info:ar-repo/semantics/tesis doctoral info:eu-repo/semantics/publishedVersion application/pdf spa info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2408_Panos

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