Identificación, separación y efecto citotóxico de los extractos acuosos de semillas de Senna occidentalis
La exposición a Senna occidentalis puede suponer un riesgo de toxicidad para humanos y animales. Las semillas contienen compuestos tales como alcaloides, albúmina tóxica, N- metilmorfina y antraquinonas. Sin embargo, los componentes responsables de su toxicidad no están claramente identificados. E...
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| Autores principales: | , , , , |
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| Formato: | Reunión |
| Lenguaje: | Español |
| Publicado: |
Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias
2024
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| Acceso en línea: | http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/55027 |
| Aporte de: |
| Sumario: | La exposición a Senna occidentalis puede suponer un riesgo de toxicidad para humanos y
animales. Las semillas contienen compuestos tales como alcaloides, albúmina tóxica, N-
metilmorfina y antraquinonas. Sin embargo, los componentes responsables de su
toxicidad no están claramente identificados. En trabajos previos hemos demostrado que
el consumo de semillas produce encefalopatía hepática en cerdos, y que la patología no se
reproduce cuando las semillas son tostadas (230°C). Es por ello que, el objetivo del
presente trabajo fue obtener extractos acuosos provenientes de semillas sin tostar (EaS)
y previamente tostadas (EaSt) de S. occidentalis para realizar en primer lugar una
separación cromatográfica de sus principales componentes y la identificación de
fracciones proteicas presentes. Además, evaluar la potencial diferencia de ambos
extractos en la citotoxicidad sobre una línea celular de células gliales. Las cromatografías
de exclusión molecular se realizaron a temperatura ambiente y presión atmosférica
utilizando una columna de Sephadex G-75. Se sembraron 50 mg de extracto (EaS o EaSt)
disueltos en PBS y filtrados. Se recogieron fracciones realizando el seguimiento a través
de la medición de la absorbancia a 280 nm. Se cuantificó la concentración proteica de
todas las fracciones recolectadas a través del método de Biuret. Por otro lado, para
determinar la citotoxicidad de ambos extractos, se utilizó la línea celular C6 de glioma
murino (ATCC:CCL-107TM). Las células se sembraron en placas de 96 pocillos (2.5 x
104/pocillo) con Dulbecco's Modified Eagle's Medium y suero fetal bovino (DMEM-SFB
10%). Al alcanzar la monocapa un 80% de confluencia, se adicionaron diferentes
concentraciones de los extractos EaS o EaSt (0,5-10 mg/mL). Luego de 48 h de incubación
a 37°C y 5% CO2, la viabilidad celular se cuantificó por tinción con el colorante cristal
violeta. El cromatograma obtenido con el extracto sin tostar (EaS), evidenció la presencia
de cuatro picos definidos (I-IV), identificando proteínas en los dos primeros (I y II). Sin
embargo, luego de sembrar el extracto tostado (EaSt), los dos primeros picos proteicos
disminuyeron significativamente observándose un pico bien definido al final del
cromatograma, posiblemente resultante de la unión de los picos III y IV. En cuanto a los
resultados de citotoxicidad, se evidenció que los extractos acuosos (EaS y EaSt) de S.
occidentalis disminuyen la viabilidad celular de manera dosis dependiente. Sin embargo,
el EaS mostró a la concentración de 6 mg/mL, mayor efecto citotóxico (89%) con respecto
a EaSt que evidenció un efecto citotóxico menor (69%). A partir de estos resultados se
puede inferir que las proteínas podrían ser uno de los principales tóxicos en el EaS. |
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