Identificación y perfil de expresión genético de nuevos genes involucrados en el desarrollo de mesodermo anterior y en el carcinoma renal de células claras (ccRCC)
Existen similitudes y paralelismos compartidos entre la embriogénesis y la oncogénesis que involucran varios eventos moleculares y morfológicos. Teniendo presente esto, esta tesis propone como objetivo general describir la expresión de genes noveles y de miembros de la superfamilia del factor de...
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| Autor principal: | |
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| Otros Autores: | |
| Formato: | Tesis doctoral |
| Lenguaje: | Español |
| Publicado: |
Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agrimensura
2023
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| Materias: | |
| Acceso en línea: | http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/52879 |
| Aporte de: |
| Sumario: | Existen similitudes y paralelismos compartidos entre la embriogénesis y la oncogénesis que
involucran varios eventos moleculares y morfológicos. Teniendo presente esto, esta tesis propone
como objetivo general describir la expresión de genes noveles y de miembros de la superfamilia del
factor de crecimiento transformante (TGF-β) en la formación del eje anteroposterior y el modelado
del mesodermo en las células madre embrionarias (ES) murinas y evaluar su posible implicancia en
el desarrollo del carcinoma renal de células claras (ccRCC).
En una primera instancia se identificaron y analizaron quince potenciales genes candidatos que
poseen un rol en el desarrollo del mesodermo murino mediante un sistema que combina el uso de
cultivos 3D (mEB) con el análisis de una serie de reacciones en cadena de la polimerasa en tiempo
real cuantitativa (RT-qPCR). Sólo de once de estos genes se evaluó su patrón de expresión génica,
posterior a la adición de moléculas estimulantes o inhibidoras con un papel relevante durante el
desarrollo murino: Activina A, proteína morfogénica ósea 4 (BMP4) y el inhibidor de Activina A
conocido como SB431542. A su vez, los patrones de expresión analizados se compararon con los de
genes de referencia del desarrollo embrionario murino (Nanog, Oct4, Nodal, T, Snail1, N-cad, Evx1,
E-cad, Sox17 y Sox1). Es así que, el análisis de los datos permitió reconocer que cinco del total de
genes candidatos (Ccpg1os, D230030E09Rik, Dmgdh, Mlf1 y Pcdh19), son sensibles a la acción de los
factores de crecimiento pertenecientes a la superfamilia del TGF-β y que también se
encuentran potencialmente involucrados en la inducción/diseño del mesodermo murino.
La vía del TGF-β tiene un rol importante tanto en la embriogénesis como en la tumorigénesis y
comprende a las BMPs. Dentro de esta subfamilia, la isoforma 7 de la proteína morfogenética ósea
(BMP7), tiene un importante papel en la fisiología y fisiopatología del riñón pre y postnatal.
Adicionalmente, se expresa en muchos tipos de carcinomas e incluso es predominante en los
carcinomas de células renales (CCR) en comparación con el tejido normal.
La familia de las BMPs, cómo se mencionó previamente, es un factor común existente entre la
embriogénesis y la oncogénesis, pero no es el único. En esta tesis se pone foco en otro elemento
compartido por ambos procesos, la hipoxia. Este estado de ausencia de oxigeno, se sabe que
desencadena mecanismos adaptativos de supervivencia celular tanto en estados fisiológicos como
fisiopatológicos y es por ello que se procede con su estudio.
Es así que, en la segunda parte de los resultados de esta tesis y mediante estudios
multiparamétricos (cultivos 3D, RT-qPCR, IHQ e ICT) se describe por primera vez en forma global a
nuestro entender la localización de BMP7 y HIF-2α (factor de transcripción clave de hipoxia) en
muestras de core y periferia de ccRCC de acuerdo a los estadíos patológicos del tumor (Clasificación TNM: I, II y III). De la misma manera se procede con E-CAD (indicativa de TEM) y Ki-67 (marcador
de proliferación).
Por otra parte, se pudo evidenciar una expresión de HIF-2α casi 5 veces mayor a la de HIF-1α, en
muestras de ccRCC la cual fue significativamente mayor en el núcleo respecto a la periferia en
todos los grupos experimentales. La determinación de los índices de proliferación (IP) de Ki-67
fueron estadísticamente más altos en el core en comparación con la periferia tumoral en todos los
estadíos estudiados. Asimismo, al evaluar la expresión de E-CAD en las muestras de ccRCC se
comprobó que era de tipo diferencial en las distintas zonas del tumor, siendo mayor en la periferia
en comparación con el centro de las mismas.
El análisis de correlación entre BMP7con Ki67 y HIF-2α, respectivamente, evidenció su asociación
con una elevada proliferación celular e hipoxia en la región del core, proporcional con el aumento
de la estadificación tumoral. A su vez, la correlación negativa existente entre BMP7 y E-CAD en la
periferia del tumor es indicativa de la disminución del progreso de la transición epitelial-
mesenquimal (TEM).
Así, en la primera parte del desarrollo de esta tesis se han identificado cinco nuevos genes sensibles
a miembros de la superfamilia del factor de crecimiento transformante (TGF-β) en las células
madre embrionarias (ES) murinas para la formación del eje anteroposterior y el modelado del
mesodermo. Y, en la segunda parte se describieron por primera vez las expresiones de BMP-7, Ki-
67, HIF-2α y E-CAD en diferentes zonas de muestras tumorales de ccRCC. En conjunto, este estudio
establece nuevas relaciones moleculares entre los eventos embriológicos y oncológicos.
Para finalizar, las conclusiones derivadas de estas tesis podrían aplicarse con el fin de utilizar la
determinación conjunta de Ki67, BMP7 y E-CAD en diferentes zonas del tumor como potenciales
biomarcadores diagnósticos y/o pronósticos para los ccRCC. |
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