Nuevo método de detección y cuantificación de Chlamydia trachomatis por PCR en tiempo real
Chlamydia trachomatis (CT) es una bacteria pandémica (92 millones de nuevos casos anuales en todo el mundo) y es reconocida como la primer causa de infecciones del tracto genital inferior a nivel global. La detección de ADN se transformó en el gold standard, sin embargo en nuestra región no es tod...
Guardado en:
| Autor principal: | |
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| Formato: | Reunión |
| Lenguaje: | Español |
| Publicado: |
Universidad Nacional del Nordeste. Secretaría General de Ciencia y Técnica
2023
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| Materias: | |
| Acceso en línea: | http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/52481 |
| Aporte de: |
| Sumario: | Chlamydia trachomatis (CT) es una bacteria pandémica (92 millones de nuevos casos anuales en todo el mundo) y es reconocida
como la primer causa de infecciones del tracto genital inferior a nivel global. La detección de ADN se transformó en el gold standard,
sin embargo en nuestra región no es todavía de uso rutinario en el diagnóstico clínico. El uso PCR en tiempo real (qPCR) se
caracteriza por ser una técnica de alta sensibilidad, reproducibilidad y eficiencia, que genera resultados confiables en poco tiempo y
fáciles de analizar. El formato de detección con sondas de hidrólisis Taqman permite cuantificar la cantidad de copias de DNA
bacteriano presente en la muestra, objetivo principal de este desarrollo. Se procedió al diseño de cebadores en forma conjunta con
sondas de hidrólisis que amplificasen regiones del plásmido críptico de 7,5 KB específico de C. trachomatis. Una vez evaluada la
performance de los primers con colorantes intercalantes se obtuvo la sonda de hidrólisis específica. Para optimizar la cuantificación
usando la mezcla diseñada de cebadores y sonda se procedió a clonar plásmidos que contengan el amplicón resultante del mismo,
funcionando de esta manera como controles positivos cuantificables. Utilizando los plásmidos clonados se elaboró una curva
estándar calculando el coeficiente de correlación y eficiencia de amplificación. Los resultados del diseño y posteriormente validación
técnica cuantitativa de esta metodología han resultado satisfactorios. Si bien los datos indican que la metodología diseñada se
encuentra dentro de parámetros aceptables aún restan detalles de optimización. Dado que las infecciones de transmisión sexual
siguen siendo un problema de compleja resolución en el nordeste argentino, el posible desarrollo y posterior transferencia de éste
tipo de metodologías al ámbito de los laboratorios clínicos para que se realicen de manera rutinaria implica un importante avance en
lo que hace a la detección rápida, confiable y con adecuada relación costo-beneficio del diagnóstico. Además, permitirá definir
conductas más adecuadas para la caracterización, el control y el seguimiento de las pacientes con infecciones agudas y crónicas por
C. trachomatis. |
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