Expresión de antígenos de fiebre aftosa en amplicones virales basados en el virus X de la papa.

El presente trabajo de Tesis propone el desarrollo de vectores para la expresión de antígenos de aftosa en amplicones virales utilizando sistemas no integrativos. El objetivo general es establecer sistemas de expresión eficientes que puedan luego ser utilizados para la...

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Detalles Bibliográficos
Autor principal: Stiefel, Erika
Otros Autores: Alicia Zelada
Formato: Tesis
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad de Belgrano. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. 2011
Materias:
fiebre aftosa
plantas transgenicas
biologia
ciencias naturales
transgenic plants
biology
natural sciences
foot and mouth disease
Acceso en línea:http://repositorio.ub.edu.ar/handle/123456789/129
Aporte de:
Repositorio Institucional - Universidad de Belgrano (UB) de Universidad de Belgrano
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description El presente trabajo de Tesis propone el desarrollo de vectores para la expresión de antígenos de aftosa en amplicones virales utilizando sistemas no integrativos. El objetivo general es establecer sistemas de expresión eficientes que puedan luego ser utilizados para la producción de plantas transgénicas que expresen virus quiméricos. El sistema de expresión no integrativo se basa en la utilización de una copia completa del genoma del virus PVX cuya expresión se encuentra dirigida por el promotor 35S de CaMV. Se construyeron amplicones recombinantes que permiten expresar los diferentes antígenos de aftosa (A, VP1 y P1) como proteína de fusión a la cápside viral produciendo viriones quiméricos. La capacidad replicativa de dichos amplicones se evaluó por agroinfiltración de plantas de tabaco. La expresión de la cápside viral fusionada a los antígenos se analizó por Western blot con anticuerpos anti-cápside y anti-epitope A de aftosa. La estabilidad genética de los amplicones virales se evaluó a través de sucesivas infecciones de plantas de tabaco con los viriones quiméricos analizando la capacidad de retención de la secuencia insertada en el genoma viral. Los resultados obtenidos permitieron determinar que el tamaño máximo de la secuencia que puede ser expresada como fusión a la cápside viral es de 800pb. Los amplicones recombinantes que contienen los antígenos A y VP1 como fusión a la cápside viral fueron capaces de replicarse y de producir viriones quiméricos estables, no así el amplicón conteniendo el antígeno P1 que sufrió recombinación perdiendo la secuencia insertada.
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