Caracterización de tres líneas celulares obtenidas a partir de melanomas humanos

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La incidencia del melanoma cutáneo maligno se ha incrementado notoriamente en los últimos años. La progresión del melanoma está bien documentada desde el punto de vista fisiopatológico; sin embargo los mecanismos moleculares y los marcadores genéticos asociados a los diferentes estadios de la enferm...

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Detalles Bibliográficos
Autor principal: Mardaraz, Claudia
Otros Autores: Wainstok, Rosa
Formato: Tesis de maestría publishedVersion
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales 2007
Acceso en línea:https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4531_Mardaraz
http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n4531_Mardaraz_oai
Aporte de:
Repositorio Digital de la Universidad de Buenos Aires (UBA) de Universidad de Buenos Aires
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description La incidencia del melanoma cutáneo maligno se ha incrementado notoriamente en los últimos años. La progresión del melanoma está bien documentada desde el punto de vista fisiopatológico; sin embargo los mecanismos moleculares y los marcadores genéticos asociados a los diferentes estadios de la enfermedad, aún no han sido completamente establecidos. Las células de melanoma expresan antígenos que pueden inducir respuesta inmune celular y humoral. La disponibilidad de líneas celulares y la caracterización de sus patrones de expresión antigénica, son de gran utilidad para el desarrollo de modelos de estudio y tratamiento del melanoma. El presente estudio se llevó a cabo con el objeto de determinar los patrones de expresión de antígenos de tres nuevas líneas celulares de melanoma metastásico humano. Las líneas celulares fueron establecidas a partir de muestras de tejido de metástasis tumoral obtenidas por procedimientos quirúrgicos realizados a tres pacientes con diagnóstico documentado de melanoma cutáneo maligno. Las nuevas líneas celulares fueron denominadas A, B y C. La línea celular de melanoma humano IIB-MEL-IAN se utilizó como control positivo de la expresión de los antígenos estudiados. El análisis de expresión de la tetraspanina CD63 y de los gangliósidos GD2 y GD3 se realizó por técnica de IF indirecta seguida del análisis por FACS. Se utilizó la técnica de RT-PCR para evaluar la expresión de los antígenos de diferenciación melanocítica MART-l, gplOO, TRP-2 y TYR, los antígenos del grupo CT denominados NY-ESO-l y MAGE-l, el antígeno MIA y la quimioquina MCP-1. El análisis realizado por IF y FACS resultó positivo para la expresión de la tetraspanina CD63 y de los gangliósidos GD2 y GD3 en las líneas celulares A y B. En la celular línea C se analizó la expresión de la tetraspanina CD63 y del gangliósido GD2. Ambos marcadores fueron reconocidos por AcMo específicos en dicha línea celular. El análisis realizado por RT-PCR resultó positivo para la expresión de MART-1, gplOO, TRP-Z, TYR, NY-ESO-l, MAGE-l, MIA y MCP-1 en las líneas celulares A y B. En la línea celular C, se investigó y se verificó la expresión de MART-1, TRP-Z, NY-ESO-l y MCP-1. En este estudio se determinaron los patrones de expresión de antígenos de tres nuevas líneas celulares de melanoma metastásico humano. Las líneas celulares caracterizadas expresan los principales AAM inmunogénicos conocidos actualmente. Las líneas celulares de melanoma humano A, B y C representan una importante fuente de antígenos con aplicación en la investigación y en el diseño de nuevas estrategias terapéuticas para el tratamiento del melanoma cutáneo maligno.
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Las líneas celulares fueron establecidas a partir de muestras de tejido de metástasis tumoral obtenidas por procedimientos quirúrgicos realizados a tres pacientes con diagnóstico documentado de melanoma cutáneo maligno. Las nuevas líneas celulares fueron denominadas A, B y C. La línea celular de melanoma humano IIB-MEL-IAN se utilizó como control positivo de la expresión de los antígenos estudiados. El análisis de expresión de la tetraspanina CD63 y de los gangliósidos GD2 y GD3 se realizó por técnica de IF indirecta seguida del análisis por FACS. Se utilizó la técnica de RT-PCR para evaluar la expresión de los antígenos de diferenciación melanocítica MART-l, gplOO, TRP-2 y TYR, los antígenos del grupo CT denominados NY-ESO-l y MAGE-l, el antígeno MIA y la quimioquina MCP-1. El análisis realizado por IF y FACS resultó positivo para la expresión de la tetraspanina CD63 y de los gangliósidos GD2 y GD3 en las líneas celulares A y B. En la celular línea C se analizó la expresión de la tetraspanina CD63 y del gangliósido GD2. Ambos marcadores fueron reconocidos por AcMo específicos en dicha línea celular. El análisis realizado por RT-PCR resultó positivo para la expresión de MART-1, gplOO, TRP-Z, TYR, NY-ESO-l, MAGE-l, MIA y MCP-1 en las líneas celulares A y B. En la línea celular C, se investigó y se verificó la expresión de MART-1, TRP-Z, NY-ESO-l y MCP-1. En este estudio se determinaron los patrones de expresión de antígenos de tres nuevas líneas celulares de melanoma metastásico humano. Las líneas celulares caracterizadas expresan los principales AAM inmunogénicos conocidos actualmente. Las líneas celulares de melanoma humano A, B y C representan una importante fuente de antígenos con aplicación en la investigación y en el diseño de nuevas estrategias terapéuticas para el tratamiento del melanoma cutáneo maligno. The incidence of malignant cutaneous melanoma has notoriously increased in the past years. Melanoma progress is well documented from the physi0pathology point of view. Even though molecular mechanisms and genetic markers associated with different stages of the disease had not been yet completely established. Melanoma cells express antigens that can induce specific T-cell and antibody responses. Establishing melanoma cell lines and characterizing its antigen expression profiles are very useful for research models and therapeutic development. The present study was performed to determine the antigen expression patterns of three new melanoma cell lines established from fresh metastatic tumor tissue samples surgically obtained from three patients with well documented diagnosed malignant cutaneous melanoma. The new cell lines were named A, B and C. IIB-MEL-IAN human melanoma cell line was used as positive control for each antigen expression studied. Expression analysis of tetraspanin CD63 and GD2 and GD3 gangliosides were performed by indirect immunofluorescence followed by FACS analysis. RT-PCR was performed to evaluate the expression of melanocyte-specific differentiation antigens MART-l, gp100, TRP-2 and TYR, CT antigens NY-ESO-l and MAGE-l, MIA and MCP-1. IF followed by FACS analysis were positive for CD63, GD2 and GD3 expression in A and B cell lines. C cell line was studied for tetraspanin CD63 and GD2 ganglioside expression. Both tetraspanin CD63 and GD2 ganglioside were recognized by each specific monoclonal antibodies in B cell line. RT-PCR analysis were positive for MART-1 gpIOO,TRP-2, TYR, NY-ESO-l, MAGE1, MIA and MCP-l expression in A and B cell lines. C cell line was studied and resulted positive for MART-l, TRP-2, NY-ESO-l and MCP-1 expression. Antigen expression patterns of three new human melanoma cell lines were established in this study. The characterized cell lines expresses the main immunogenic melanoma associated antigens known so far. The human melanoma A, B and C cell lines represent an important antigen source for basic research and for the design of new therapeutic approaches to target malignant cutaneous melanoma. Fil: Mardaraz, Claudia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. application/pdf https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4531_Mardaraz spa Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar Caracterización de tres líneas celulares obtenidas a partir de melanomas humanos info:eu-repo/semantics/masterThesis info:ar-repo/semantics/tesis de maestría info:eu-repo/semantics/publishedVersion http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n4531_Mardaraz_oai

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