Receptores con actividad de quinasa en tirosina tipo I, erbB1, erbB2, erbB3, erbB4 en la diferenciación adipocítica de las células Swiss 3T3-L1

Mostrar todas las versiones(3)

La alta incidencia de la obesidad, y las patologías asociadas, la diabetes y las enfermedades cardiovasculares, ha producido la necesidad de profundizar nuestro conocimiento del funcionamiento de la adipogénesis. Los fibroblastos pre-determinados del tejido adiposo sufren, en presencia de glucosa y...

Descripción completa

Guardado en:
Detalles Bibliográficos
Autor principal: Pagano, Eleonora
Otros Autores: Calvo, Juan Carlos
Formato: Tesis doctoral publishedVersion
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales 2005
Materias:
EGFR/ERBB1
ERBB2
FIBROBLASTOS
PROLIFERACION
ADIPOGENESIS
DIFERENCIACION
FIBROBLASTS
PROLIFERATION
DIFFERENTIATION
Acceso en línea:http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3814_Pagano
http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n3814_Pagano_oai
Aporte de:
Repositorio Digital de la Universidad de Buenos Aires (UBA) de Universidad de Buenos Aires
id I28-R145-tesis_n3814_Pagano_oai
record_format dspace
institution Universidad de Buenos Aires
institution_str I-28
repository_str R-145
collection Repositorio Digital de la Universidad de Buenos Aires (UBA)
language Español
orig_language_str_mv spa
topic EGFR/ERBB1
ERBB2
FIBROBLASTOS
PROLIFERACION
ADIPOGENESIS
DIFERENCIACION
EGFR/ERBB1
ERBB2
FIBROBLASTS
PROLIFERATION
ADIPOGENESIS
DIFFERENTIATION
spellingShingle EGFR/ERBB1
ERBB2
FIBROBLASTOS
PROLIFERACION
ADIPOGENESIS
DIFERENCIACION
EGFR/ERBB1
ERBB2
FIBROBLASTS
PROLIFERATION
ADIPOGENESIS
DIFFERENTIATION
Pagano, Eleonora
Receptores con actividad de quinasa en tirosina tipo I, erbB1, erbB2, erbB3, erbB4 en la diferenciación adipocítica de las células Swiss 3T3-L1
topic_facet EGFR/ERBB1
ERBB2
FIBROBLASTOS
PROLIFERACION
ADIPOGENESIS
DIFERENCIACION
EGFR/ERBB1
ERBB2
FIBROBLASTS
PROLIFERATION
ADIPOGENESIS
DIFFERENTIATION
description La alta incidencia de la obesidad, y las patologías asociadas, la diabetes y las enfermedades cardiovasculares, ha producido la necesidad de profundizar nuestro conocimiento del funcionamiento de la adipogénesis. Los fibroblastos pre-determinados del tejido adiposo sufren, en presencia de glucosa y otros factores hormonales, el proceso adipogénico, el cual los convierte en células adiposas o adipocitos. El adipocito no es sólo un reservorio de energía extra sino además y principalmente un centro de regulación metabólica. Cuando el tejido adiposo no puede acomodar este exceso lipídico, la grasa se deposita anormalmente en otros tejidos, condición conocida como obesidad. Por este motivo el estudio de los mecanismos involucrados en la proliferación y en la diferenciación de estas células puede contribuir al tratamiento de las patologías antes mencionadas. Con este objetivo, la participación en este proceso de distintos factores de crecimiento, como la insulina, el IGF-1 y el EGF, se ha estudiado profundamente tanto en experimentos in vivo como in vitro. En el presente estudio se demostró que la modulación de erbB2 durante la proliferación e inducción adipogénica de preadipocitos tiene un papel fundamental en el proceso adipogénico. Se utilizó como modelo la línea celular murina Swiss 3T3-L1, la cual espontáneamente o por inducción hormonal diferencia a adipocitos. Se estudiaron los receptores con actividad de tirosina quinasa tipo I, erbB1/EGFR, erbB2, erbB3 y erbB4 y ligandos, heregulina y EGF, en cuanto a expresión, activación y modulación durante el proceso adipogénico. Se demostró por primera vez en las células 3T3-L1 expresión de los ARNm para erbB2, EGFR y erbB3. A nivel proteico, la expresión de erbB2 y EGFR aumentó durante la etapa proliferativa, disminuyendo significativamente en respuesta a la inducción adipogénica post-arresto celular (por tratamiento con MIX y dexametasona en presencia de suero fetal bovino), demostrando un patrón de regulación similar. El avance hacia el estado diferenciado se acompañó de un aumento en la expresión de heregulina en su forma madura. Esta misma expresión endógena de heregulina posiblemente impidiera la activación de erbB2 en respuesta a la misma, mientras que tanto erbB2 como EGFR sí se fosforilaron en tirosina en respuesta a EGF, formando además un heterodímero entre ellos. Este resultado demostró que la interacción de estos receptores es posible en estas células. La participación funcional de erbB2 en este modelo quedó demostrada por experimentos de inhibición farmacológica del receptor. Con la utilización de las tirfostinas AG 825 y AG 879 durante la proliferación de las células 3T3-L1 se observó una inhibición de la proliferación de las mismas, demostrando la participación de erbB2 en dicho proceso. La inhibición del receptor durante la inducción adipogénica potenció el efecto de los inductores aunque no es capaz de reemplazarlos, aportando más evidencias de que la disminución de la expresión y/o activación de erbB2 favorecería el proceso adipogénico. La inducción adipogénica también activó tres vías diferentes de señalización: MAPK, JNK y p38. La expresión de erbB2 se vió aún más inhibida por el tratamiento con inhibidores de MAPK (PD98059) y JNK (SP600124). La activación de estas quinasas en respuesta a la inducción posiblemente retrasaría la disminución de erbB2, o alternativamente, otras vías de señalización no estudiadas en el presente trabajo estarían involucradas en dicho proceso. Estos resultados aportan la primera evidencia del papel de erbB2 en la diferenciación adipocítica.
author2 Calvo, Juan Carlos
author_facet Calvo, Juan Carlos
Pagano, Eleonora
format Tesis doctoral
Tesis doctoral
publishedVersion
author Pagano, Eleonora
author_sort Pagano, Eleonora
title Receptores con actividad de quinasa en tirosina tipo I, erbB1, erbB2, erbB3, erbB4 en la diferenciación adipocítica de las células Swiss 3T3-L1
title_short Receptores con actividad de quinasa en tirosina tipo I, erbB1, erbB2, erbB3, erbB4 en la diferenciación adipocítica de las células Swiss 3T3-L1
title_full Receptores con actividad de quinasa en tirosina tipo I, erbB1, erbB2, erbB3, erbB4 en la diferenciación adipocítica de las células Swiss 3T3-L1
title_fullStr Receptores con actividad de quinasa en tirosina tipo I, erbB1, erbB2, erbB3, erbB4 en la diferenciación adipocítica de las células Swiss 3T3-L1
title_full_unstemmed Receptores con actividad de quinasa en tirosina tipo I, erbB1, erbB2, erbB3, erbB4 en la diferenciación adipocítica de las células Swiss 3T3-L1
title_sort receptores con actividad de quinasa en tirosina tipo i, erbb1, erbb2, erbb3, erbb4 en la diferenciación adipocítica de las células swiss 3t3-l1
publisher Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
publishDate 2005
url http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3814_Pagano
http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n3814_Pagano_oai
work_keys_str_mv AT paganoeleonora receptoresconactividaddequinasaentirosinatipoierbb1erbb2erbb3erbb4enladiferenciacionadipociticadelascelulasswiss3t3l1
AT paganoeleonora typeitirosinekinasereceptorserbb1erbb2erbb3erbb4intheadipogenicdifferentiationofswiss3t3licells
_version_ 1782032369185718272
spelling I28-R145-tesis_n3814_Pagano_oai2023-08-03 Calvo, Juan Carlos Pagano, Eleonora 2005 La alta incidencia de la obesidad, y las patologías asociadas, la diabetes y las enfermedades cardiovasculares, ha producido la necesidad de profundizar nuestro conocimiento del funcionamiento de la adipogénesis. Los fibroblastos pre-determinados del tejido adiposo sufren, en presencia de glucosa y otros factores hormonales, el proceso adipogénico, el cual los convierte en células adiposas o adipocitos. El adipocito no es sólo un reservorio de energía extra sino además y principalmente un centro de regulación metabólica. Cuando el tejido adiposo no puede acomodar este exceso lipídico, la grasa se deposita anormalmente en otros tejidos, condición conocida como obesidad. Por este motivo el estudio de los mecanismos involucrados en la proliferación y en la diferenciación de estas células puede contribuir al tratamiento de las patologías antes mencionadas. Con este objetivo, la participación en este proceso de distintos factores de crecimiento, como la insulina, el IGF-1 y el EGF, se ha estudiado profundamente tanto en experimentos in vivo como in vitro. En el presente estudio se demostró que la modulación de erbB2 durante la proliferación e inducción adipogénica de preadipocitos tiene un papel fundamental en el proceso adipogénico. Se utilizó como modelo la línea celular murina Swiss 3T3-L1, la cual espontáneamente o por inducción hormonal diferencia a adipocitos. Se estudiaron los receptores con actividad de tirosina quinasa tipo I, erbB1/EGFR, erbB2, erbB3 y erbB4 y ligandos, heregulina y EGF, en cuanto a expresión, activación y modulación durante el proceso adipogénico. Se demostró por primera vez en las células 3T3-L1 expresión de los ARNm para erbB2, EGFR y erbB3. A nivel proteico, la expresión de erbB2 y EGFR aumentó durante la etapa proliferativa, disminuyendo significativamente en respuesta a la inducción adipogénica post-arresto celular (por tratamiento con MIX y dexametasona en presencia de suero fetal bovino), demostrando un patrón de regulación similar. El avance hacia el estado diferenciado se acompañó de un aumento en la expresión de heregulina en su forma madura. Esta misma expresión endógena de heregulina posiblemente impidiera la activación de erbB2 en respuesta a la misma, mientras que tanto erbB2 como EGFR sí se fosforilaron en tirosina en respuesta a EGF, formando además un heterodímero entre ellos. Este resultado demostró que la interacción de estos receptores es posible en estas células. La participación funcional de erbB2 en este modelo quedó demostrada por experimentos de inhibición farmacológica del receptor. Con la utilización de las tirfostinas AG 825 y AG 879 durante la proliferación de las células 3T3-L1 se observó una inhibición de la proliferación de las mismas, demostrando la participación de erbB2 en dicho proceso. La inhibición del receptor durante la inducción adipogénica potenció el efecto de los inductores aunque no es capaz de reemplazarlos, aportando más evidencias de que la disminución de la expresión y/o activación de erbB2 favorecería el proceso adipogénico. La inducción adipogénica también activó tres vías diferentes de señalización: MAPK, JNK y p38. La expresión de erbB2 se vió aún más inhibida por el tratamiento con inhibidores de MAPK (PD98059) y JNK (SP600124). La activación de estas quinasas en respuesta a la inducción posiblemente retrasaría la disminución de erbB2, o alternativamente, otras vías de señalización no estudiadas en el presente trabajo estarían involucradas en dicho proceso. Estos resultados aportan la primera evidencia del papel de erbB2 en la diferenciación adipocítica. The high incidence of diseases such as obesity and associated pathologies, such as diabetes and cardiovascular diseases, led to the need of understanding the process of adipogenesis. The predetermined fibroblasts from adipose tissue undergo, in the presence of glucose and other hormonal factors, an adipogenic process and become adipose cells or adipocytes. The adipocyte is not only a reservoir for energy but, also and mainly, a center of metabolic regulation. When the adipose tissue cannot longer accommodate the excess of lipids, fat accumulates in other tissues and the individual becomes obese. This is why the study of the mechanisms involved in cell proliferation and differentiation could contribute to the treatment of the above mentioned pathologies. With this objective in mind, the participation of different growth factors on this adipogenic process has been studied both in vivo and in vitro. In this work, it has been demonstrated that the modulation of erbB2 during proliferation and adipogenic induction of preadipocytes plays a fundamental role on adipogenesis. As a model, murine Swiss 3T3-L1 cell line was utilized, which either spontaneously or hormonally induced differentiates into adipocytes. Receptors with tyrosine kinase type I activity were studied, erbB1/EGFR, erbB2, erbB3 y erbB4 as well as ligands, heregulin and EGF, in terms of expression, activation and modulation during the adipogenic process. For the first time it was demonstrated on the 3T3-L1 cells, the expression of mARN for erbB2, EGFR and erbB3. On a protein level, the expression of erbB2 and EGFR increased during the proliferative phase, significantly decreasing thereafter in response to adipogenic induction (with MIX and dexamethasone in the presence of fetal bovine serum), following cellular arrest, and thus demonstrating a pattern of similar regulation. The progress towards a differentiated state was accompanied by an increase in the expresión of mature heregulin. This very same endogenous expression could be responsible for preventing the activation of erbB2 in response to exogenous heregulin, while both erbB2 and EGFR were tyrosinephosphorylated in response to EGF, forming a heterodimer. This result demonstrated that an interaction between these two receptors is possible in these cells. The functional participation of erbB2 in this model was demonstrated by experiments on pharmacological inhibition of the receptor. The use of tyrphostins AG 825 and AG 879 during 3T3-L1 cells proliferation resulted in an inhibition of this process, demonstrating the participation of erbB2 at this stage. The inhibition of the receptor during adipogenic induction, potentiated the effect of the inducers, but was unable to replace them, and thus indicating that the decrease in the expression/activation of erbB2 would favor the adipogenic process. The adipogenic induction also activated three different signaling pathways: MAPK, JNK and p38. The expression of erbB2 was inhibited by the MAPK inhibitor (PD98059) and JNK inhibitor (SP600124). Activation of these kinases, in response to induction, could retard the down-regulation of erbB2 or, alternatively, other signaling pathways not studied in this work could be involved. These results constitute the first evidence of the role of erbB2 in adipose differentiation. Fil: Pagano, Eleonora. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. application/pdf http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3814_Pagano spa Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar EGFR/ERBB1 ERBB2 FIBROBLASTOS PROLIFERACION ADIPOGENESIS DIFERENCIACION EGFR/ERBB1 ERBB2 FIBROBLASTS PROLIFERATION ADIPOGENESIS DIFFERENTIATION Receptores con actividad de quinasa en tirosina tipo I, erbB1, erbB2, erbB3, erbB4 en la diferenciación adipocítica de las células Swiss 3T3-L1 Type I tirosine kinase receptors, erbB1, erbB2, erbB3, erbB4, in the adipogenic differentiation of Swiss 3T3-LI cells info:eu-repo/semantics/doctoralThesis info:ar-repo/semantics/tesis doctoral info:eu-repo/semantics/publishedVersion http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n3814_Pagano_oai

Ejemplares similares