Inositolfoslípidos libres y como anclas de glicoproteínas en Trypanosoma cruzi : estructura y biosíntesis

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En este trabajo se presenta un análisis detallado de los inositolfosfolípidos (IPLs) de células epimastigotes de T. cruzi y de la variación de lípidos libres durante elproceso de diferenciación celular de trypomastigotes a amastigotes y a epimastigotes. Los IPLs están formados por dos componentes qu...

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Detalles Bibliográficos
Autor principal: Bertello, Laura Elena
Otros Autores: Muchnik de Lederkremer, Rosa María
Formato: Tesis doctoral publishedVersion
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales 2000
Materias:
TRYPANOSOMA CRUZI
INOSITOLFOSFOLIPIDOS
GPI
CERAMIDA
FOSFOLIPASAS
SSP-4
ALQUILACILGLICEROL
INOSITOLPHOSPHOLIPIDS
CERAMIDE
PHOSPHOLIPASES
ALKYLACYLGLYCEROL
Acceso en línea:https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3308_Bertello
https://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n3308_Bertello_oai
Aporte de:
Repositorio Digital de la Universidad de Buenos Aires (UBA) de Universidad de Buenos Aires
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description En este trabajo se presenta un análisis detallado de los inositolfosfolípidos (IPLs) de células epimastigotes de T. cruzi y de la variación de lípidos libres durante elproceso de diferenciación celular de trypomastigotes a amastigotes y a epimastigotes. Los IPLs están formados por dos componentes que se caracterizaron comofosfatidilinositol (PI) e inositolfosfoceramida (IPC). El PI está constituido pordiacilglicerol y 1-0-alquil-2-acilglicerol y la IPC por N-palmitoildihidroesfingosina, N-palmitoilesfingosina, N-estearoildihidroesfingosina y N-estearoilesfingosina. Testigos de alquilacilgliceroles, no disponibles comercialmente, fueronsintetizados por dos métodos, uno enzimático y otro químico. Durante la diferenciación de trypomastigotes a amastigotes hay un aumento dela ceramida libre, principalmente palmitoildihidroesfingosina, que coincide con laliberación progresiva de la glicoproteína Ssp-4, antígeno de superficie específico decélulas amastigotes, que se encuentra anclado por GPI. La porción lipídica del ancla deesta glicoproteína se identificó como la palmitoildihidroesfingosina; lo que abre laposibilidad de que la ceramida juegue algún rol en la diferenciación celular. Se determinó la presencia en membranas de T. cruzi de fosfolipasas A1, A2, C yde aciltransferasas. También se estudió el primer paso de la biosíntesis de las anclas GPI, es decir,la incorporación de GlcNH2 a partir de UDP-[3H]GlcNAc y se descartó a la IPC comoaceptora de GlcNH2 para la formación de anclas con ceramida. Este resultado indicaríaque las fosfolipasas identificadas estarían involucradas en procesos de remodelaciónde los lípidos de los GIPLs que son utilizados para la construcción de anclas GPI. Este trabajo contribuye al conocimiento de las estructuras y del caminobiosíntético de los GPI de T. cruzi que anclan, a la membrana, glicoproteínasinvolucradas en procesos de diferenciación, reconocimiento y penetración celular. Lainhibición del anclaje de estas glicoproteínas a la membrana constituye una alternativaatractiva como quimioterapia contra la enfermedad de Chagas.
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spelling I28-R145-tesis_n3308_Bertello_oai2024-09-02 Muchnik de Lederkremer, Rosa María Bertello, Laura Elena 2000 En este trabajo se presenta un análisis detallado de los inositolfosfolípidos (IPLs) de células epimastigotes de T. cruzi y de la variación de lípidos libres durante elproceso de diferenciación celular de trypomastigotes a amastigotes y a epimastigotes. Los IPLs están formados por dos componentes que se caracterizaron comofosfatidilinositol (PI) e inositolfosfoceramida (IPC). El PI está constituido pordiacilglicerol y 1-0-alquil-2-acilglicerol y la IPC por N-palmitoildihidroesfingosina, N-palmitoilesfingosina, N-estearoildihidroesfingosina y N-estearoilesfingosina. Testigos de alquilacilgliceroles, no disponibles comercialmente, fueronsintetizados por dos métodos, uno enzimático y otro químico. Durante la diferenciación de trypomastigotes a amastigotes hay un aumento dela ceramida libre, principalmente palmitoildihidroesfingosina, que coincide con laliberación progresiva de la glicoproteína Ssp-4, antígeno de superficie específico decélulas amastigotes, que se encuentra anclado por GPI. La porción lipídica del ancla deesta glicoproteína se identificó como la palmitoildihidroesfingosina; lo que abre laposibilidad de que la ceramida juegue algún rol en la diferenciación celular. Se determinó la presencia en membranas de T. cruzi de fosfolipasas A1, A2, C yde aciltransferasas. También se estudió el primer paso de la biosíntesis de las anclas GPI, es decir,la incorporación de GlcNH2 a partir de UDP-[3H]GlcNAc y se descartó a la IPC comoaceptora de GlcNH2 para la formación de anclas con ceramida. Este resultado indicaríaque las fosfolipasas identificadas estarían involucradas en procesos de remodelaciónde los lípidos de los GIPLs que son utilizados para la construcción de anclas GPI. Este trabajo contribuye al conocimiento de las estructuras y del caminobiosíntético de los GPI de T. cruzi que anclan, a la membrana, glicoproteínasinvolucradas en procesos de diferenciación, reconocimiento y penetración celular. Lainhibición del anclaje de estas glicoproteínas a la membrana constituye una alternativaatractiva como quimioterapia contra la enfermedad de Chagas. A detailed analysis of inositolphospholipids (IPLs) from epimastigote cells of T.cruzi, and the regulated expression of free lipids during the cellular differentiationprocess from trypomastigotes to amastigotes and epimastiogtes is presented. The IPLsare formed by two components that were characterized as phosphatidylinositol (PI)and inositolphosphoceramide (IPC). The PI has a diacylglycerol and an l-O-alkyl-2-acylglycerol,and the IPC is constituted by N-palmitoyldihydrosphingosine, Npalmitoylsphingosine, N-stearoyldihydrosphingosine and N-stearoylsphingosine as thelipid moiety. The alkylacylglycerols needed as standards were synthesized by two differentchemical and enzymatic methods. During the differentiation of trypomastigotes to amastigotes, there is an increase offree ceramides, mainly palmitoyldihydrosphingosine. This is coincident with the progressiveshedding of the Ssp-4 glycoprotein, a surface antigen specific of amastigote cells, that isanchored through GPI. The lipid moiety of this glycoprotein anchor was identified aspalmitoyldihydrosphingosine, which suggests that ceramide plays a role in cellulardifferentiation. The presence of phospholipases Al, A2,C and acyltransferases in T. cruzi membraneswas ascertained. The two latter activities were also proved on IPC. The incorporation of GlcNH2 from UDP-[3H]-GlcNAc, the first step of the GPIanchor biosynthesis, was also studied. The possibility of IPC acting as acceptor of GlcNH2 toform anchors with ceramides was disproved suggesting that the identified phospholipasesmay be involved in the process of remodelling GIPLs used in the formation of GPI anchors. This thesis contributes to the knowledge of structures and biosynthetic pathways of T.cruzi GPIs that anchor membrane glycoproteins involved in cellular differentiation,recognition and penetration processes. Inhibition of the anchoring to membranes, is anatractive alternative in Chagas disease chemoterapy. Fil: Bertello, Laura Elena. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. application/pdf https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3308_Bertello spa Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar TRYPANOSOMA CRUZI INOSITOLFOSFOLIPIDOS GPI CERAMIDA FOSFOLIPASAS SSP-4 ALQUILACILGLICEROL TRYPANOSOMA CRUZI INOSITOLPHOSPHOLIPIDS GPI CERAMIDE PHOSPHOLIPASES SSP-4 ALKYLACYLGLYCEROL Inositolfoslípidos libres y como anclas de glicoproteínas en Trypanosoma cruzi : estructura y biosíntesis Inositolphospholipids, free and as anchors of glycoproteins in Trypanosoma cruzi. Structure and biosynthesis info:eu-repo/semantics/doctoralThesis info:ar-repo/semantics/tesis doctoral info:eu-repo/semantics/publishedVersion https://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n3308_Bertello_oai

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