Componentes lipídicos de formas trypomastigote de Trypanosoma cruzi : marcación metabólica y estudio estructural
En este trabajo de Tesis se realizó un estudio estructural de loscomponentes lipídicos de formas trypomastigote de Trypanosoma cruzi, con el finde aclarar algunos aspectos esenciales en los caminos biosintéticos del estadíoinfectante. A partir de la incorporación de ácido [³H]-palmít...
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Formato: | Tesis doctoral publishedVersion |
Lenguaje: | Español |
Publicado: |
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
1996
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Acceso en línea: | https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2884_Uhrig http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n2884_Uhrig_oai |
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En este trabajo de Tesis se realizó un estudio estructural de loscomponentes lipídicos de formas trypomastigote de Trypanosoma cruzi, con el finde aclarar algunos aspectos esenciales en los caminos biosintéticos del estadíoinfectante. A partir de la incorporación de ácido [³H]-palmítico se caracterizarontriglicéridos, ácidos grasos libres y lípidos zwiteriónicos como fosfatidiletanolamina,fosfatidilcolina y sus lisoderivados. Cada uno de ellos fue purificado, cuantificado ycaracterizado químicamente. Fue determinada la limitada capacidad de formastrypomastigote para elongar ácidos grasos, y en contraposición con otras formasno infectantes del parásito se observó la ausencia de ácidos grasos insaturadosatribuíble a una baja actividad de desaturasas en este estadío. A partir de la incorporación de [14C]-etanolamina se purificaronfosfatidiletanolamina, lisofosfatidiletanolamina y dimetilfosfatidiletanolaminamarcados. Se determinó que la fosfatidiletanolamina no es biosintetizada pormetilación secuencial de la fosfatidiletanolamina y que por otra parte, ésta esbiosintetizada a través del camino de Kennedy. Entre los lípidos ácidos, fueron caracterizados dos tipos deinositolfosfolípidos: IPL1 compuesto por una mezcla de N-palmitoilesfingosina y N-palmitoildihidroesfingosina,e IPL2 constituido por 1,2-diacil- y 1-0-alquil-2-acilglicerolcon la misma cabeza polar. Estos compuestos serían posiblesprecursores biosintéticos de las anclas de glicoproteínas a la membrana descriptasen formas trypomastigote. Por otra parte, fue aislado y purificado por primera vez un sulfoglicolípidoformado por N-palmitoilesfingosina unida a un oligosacárido que contienegalactosa, glucosa, N-acetilgalactosamina y ácido glucurónico. La presencia deeste sulfoglicolípido en las formas infectantes del parásito podría estar relacionadacon la inmunopatología asociada a la enfermedad de Chagas. |
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I28-R145-tesis_n2884_Uhrig_oai2023-04-26 Couto, Alicia Susana Muchnik de Lederkremer, Rosa María Uhrig, María Laura 1996 En este trabajo de Tesis se realizó un estudio estructural de loscomponentes lipídicos de formas trypomastigote de Trypanosoma cruzi, con el finde aclarar algunos aspectos esenciales en los caminos biosintéticos del estadíoinfectante. A partir de la incorporación de ácido [³H]-palmítico se caracterizarontriglicéridos, ácidos grasos libres y lípidos zwiteriónicos como fosfatidiletanolamina,fosfatidilcolina y sus lisoderivados. Cada uno de ellos fue purificado, cuantificado ycaracterizado químicamente. Fue determinada la limitada capacidad de formastrypomastigote para elongar ácidos grasos, y en contraposición con otras formasno infectantes del parásito se observó la ausencia de ácidos grasos insaturadosatribuíble a una baja actividad de desaturasas en este estadío. A partir de la incorporación de [14C]-etanolamina se purificaronfosfatidiletanolamina, lisofosfatidiletanolamina y dimetilfosfatidiletanolaminamarcados. Se determinó que la fosfatidiletanolamina no es biosintetizada pormetilación secuencial de la fosfatidiletanolamina y que por otra parte, ésta esbiosintetizada a través del camino de Kennedy. Entre los lípidos ácidos, fueron caracterizados dos tipos deinositolfosfolípidos: IPL1 compuesto por una mezcla de N-palmitoilesfingosina y N-palmitoildihidroesfingosina,e IPL2 constituido por 1,2-diacil- y 1-0-alquil-2-acilglicerolcon la misma cabeza polar. Estos compuestos serían posiblesprecursores biosintéticos de las anclas de glicoproteínas a la membrana descriptasen formas trypomastigote. Por otra parte, fue aislado y purificado por primera vez un sulfoglicolípidoformado por N-palmitoilesfingosina unida a un oligosacárido que contienegalactosa, glucosa, N-acetilgalactosamina y ácido glucurónico. La presencia deeste sulfoglicolípido en las formas infectantes del parásito podría estar relacionadacon la inmunopatología asociada a la enfermedad de Chagas. In this Thesis, a structural characterization of the lipidic componentsobtained from the trypomastigote stage of Trypanosoma cruzi was performed. Metabolic incorporation of [³H]-palmitic acid allowed the isolation andpurification of triacylglycerols, free fatty acids and zwitterionic lipids. Each of thesecomponents was quantified and chemically characterized. The limited capacity oftrypomastigote forms to elongate fatty acids was determined. in contrast with othernon-infective forms of the parasite, the absence of unsaturated fatty acids due to alow activity of desaturases was observed. From the metabolic incorporation of [14C]-ethanolamine,phosphatidylethanolamine, lysophosphatidylethanolamine and dimethylphosphatidylethanolaminewere isolated and characterized. Interestingly, no labeledphosphatidylcholine was observed indicating that this phospholipid is notbiosynthesized by secuencial methylation of phosphatidylethanolamine. Among the acidic lipids, two classes of inositolphospholipids werecharacterized: IPL1 formed by N-palmitoylsphingosine and N-palmitoyldihydrosphingosine,and IPL2 formed by 1,2-diacyl- and 1-0-alkyl-2-acylglycerol,both of them linked to the same polar moiety. These components canbe considered putative precursors of the anchors of membrane glycoproteinsdescribed in the trypomastigote stage. Finally, a sulfoglycolipid was, for the first time, isolated and purified from theinfective stage; N-palmitoylsphingosine linked to an oligosaccharide with galactose,glucose N-acetilgalactosamine and glucuronic acid as components, wasdetermined. The presence of this sulfoglycolipid may be related to theimmunopathology associated with Chagas' disease. Fil: Uhrig, María Laura. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. application/pdf https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2884_Uhrig spa Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar Componentes lipídicos de formas trypomastigote de Trypanosoma cruzi : marcación metabólica y estudio estructural info:eu-repo/semantics/doctoralThesis info:ar-repo/semantics/tesis doctoral info:eu-repo/semantics/publishedVersion http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n2884_Uhrig_oai |