Desarrollo de un sistema de pseudovirus para el estudio in vitro del nuevo M ammarenavirus patogénico S abi á like? ( SABV L ), nuevo causante de la fiebre hemorrágica brasileña

Fil: Batto, María Victoria. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Buenos Aires, Argentina

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Detalles Bibliográficos
Autor principal:	Batto, María Victoria
Otros Autores:	García, Cybele C.
Formato:	Tesis de maestría acceptedVersion
Lenguaje:	Español
Publicado:	Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2022
Materias:	Arenavirus SABV-Like Anticuerpo monoclonal OKT9 Fiebres hemorrágicas sudamericanas Mammarenavirus Ciencias de la vida
Acceso en línea:	http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=afamaster&cl=CL1&d=HWA_6746 https://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/collect/afamaster/index/assoc/HWA_6746.dir/6746.PDF
Aporte de:	Repositorio Digital de la Universidad de Buenos Aires (UBA) de Universidad de Buenos Aires

id	I28-R145-HWA_6746
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spelling	I28-R145-HWA_67462025-07-31 Fil: Batto, María Victoria. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Buenos Aires, Argentina García, Cybele C. Helguera, Gustavo Batto, María Victoria 2022-03-21 Entre los Mammarenavirus del Nuevo Mundo (NWM) del clado B se encuentran los agentes etiológicos causantes de las Fiebres Hemorrágicas Sudamericanas. Estos virus integran una familia de patógenos de prioridad A debido a su alta infectividad y mortalidad, con limitadas opciones terapéuticas. En 2020 se identificó en Brasil un nuevo miembro de la familia, que causó una víctima fatal, y por alta homología con el virus Sabiá ha sido denominado Sabiá-like (SABV-L). En este trabajo nos dispusimos a estudiar y caracterizar este nuevo Mammarenavirus causante de la Fiebre Hemorrágica Brasilera. Dado que los NWM patogénicos utilizan el receptor de transferrina humano 1 (hTfR1) y la vía de las clatrinas para su entrada a la celula, nos dispusimos a determinar el papel de este receptor y su vía en la entrada celular de SABV-L.\nPara estos estudios desarrollamos partículas virales pseudotipadas de SABV-L cotransfectando células HEK293T con un sistema de 3 vectores que expresan: a) la poliproteína estructural gag/pol de MuLV; b) el gen reportero eGFP; y c) las glicoproteínas GP1/GP2 de SABV-L (GenBank: MN956774).\nEstudios de microscopía de fluorescencia y citometría de flujo permitieron confirmar un rol importante de hTfR1 en la internalización de pseudovirus de SABV-L. Células CHO-hTfR1 que expresan hTfR1 mostraron altos niveles de fluorescencia en presencia de pseudovirus de SABV-L, pero no las células CHO-K1 que no expresan hTfR1. Así mismo, se observó una inhibición significativa de internalización del PV-SABV-L en células HEK293T que expresan hTfR1 en presencia de 450 nM de hTfR1 soluble.\nEnsayos adicionales mostraron una inhibición significativa de la internalización de pseudovirus de SABV-L en presencia de clorpromazina, un inhibidor de la vía de las clatrinas. Además, el anticuerpo monoclonal anti-hTfR1 OKT9, demostró bloquear de forma dosis dependiente la internalización de PV-SABV-L tanto en forma de IgG completa (IC50: 0,63nM) como de Fab-OKT9 (IC50: 10,19nM).\nEstos resultados proporcionan evidencia de un importante rol de hTfR1 y de la vía de las clatrinas en la entrada de SABV-L y sugieren la factibilidad de desarrollar un agente terapéutico a partir de OKT9. application/pdf Castilla, Viviana Scolaro, Luis Romanowski, Victor Arenavirus SABV-Like Anticuerpo monoclonal OKT9 Fiebres hemorrágicas sudamericanas Mammarenavirus spa Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica info:eu-repo/semantics/openAccess http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/ Ciencias de la vida Magíster de la Universidad de Buenos Aires en Biotecnología Desarrollo de un sistema de pseudovirus para el estudio in vitro del nuevo M ammarenavirus patogénico S abi á like? ( SABV L ), nuevo causante de la fiebre hemorrágica brasileña info:eu-repo/semantics/masterThesis info:ar-repo/semantics/tesis de maestría info:eu-repo/semantics/acceptedVersion http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=afamaster&cl=CL1&d=HWA_6746 https://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/collect/afamaster/index/assoc/HWA_6746.dir/6746.PDF
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