Estudio de las bases bioquímicas y moleculares de la actividad hidrolítica de variantes salvajes y mutacionales de ß-lactamasas CTX-M sobre oximino-cefalosporinas : papel de mutaciones puntuales en la expansión del espectro de hidrólisis

Most CTX-M producing microorganisms are usually resistant to cefotaxime but susceptible to ceftazidime. Therefore, these enzymes are called "cefotaximases". However, there are emerging variants possessing the Asp240Gly mutation that are able to confer resistance to cefotaxime and ceftazidi...

Descripción completa

Guardado en:
Detalles Bibliográficos
Autor principal: Ghiglione, Bárbara
Otros Autores: Power, Pablo
Formato: Tesis doctoral acceptedVersion
Lenguaje:Español
Publicado: Facultad de Farmacia y Bioquímica 2015
Materias:
ß-lactamasa
CTX-M
Ceftazidima
Mutaciones
Hidrólisis
Ciencia de la vida
Acceso en línea:http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=posgraafa&cl=CL1&d=HWA_1167
http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/collect/posgraafa/index/assoc/HWA_1167.dir/1167.PDF
Aporte de:
Repositorio Digital de la Universidad de Buenos Aires (UBA) de Universidad de Buenos Aires
id I28-R145-HWA_1167
record_format dspace
spelling I28-R145-HWA_11672019-09-25 Most CTX-M producing microorganisms are usually resistant to cefotaxime but susceptible to ceftazidime. Therefore, these enzymes are called "cefotaximases". However, there are emerging variants possessing the Asp240Gly mutation that are able to confer resistance to cefotaxime and ceftazidime simultaneously.\nIn this work we demonstrate that the Asp240Gly mutation is associated with a ceftazidime resistance phenotype only when Escherichia coli hyperproducing clones lacked porin OmpF in the outer membrane.\nSubstitution of glycine at position 240 does not visibly affect the conformation or the stability of the enzyme, resulting in conserved catalytic efficiencies against most ?-lactam antibiotics. However, the mutation leads to a higher conformational flexibility that allows ceftazidime to accommodate its bulky substituent in the active site cavity, so that it can be hydrolysed more efficiently. CTX-MAsp240Gly ?-lactamases have catalytic efficiencies towards ceftazidime between 5 and 15 times higher than those of their respective wild variants, although these are still at least 200 times lower than cefotaxime.\nDespite having subtle effects on the kinetic behavior, the Asp240Gly mutation can provide a selective advantage when combined with low permeability in a suitable selection environment.\n Fil: Ghiglione, Bárbara. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina Power, Pablo Facultad de Farmacia y Bioquímica Gutkind, Gabriel Ghiglione, Bárbara 2015-03-27 La mayoría de los microorganismos productores de ?-lactamasas CTX-M suele ser resistente a cefotaxima pero sensible a ceftazidima. Por esta razón, estas enzimas se conocen como ?cefotaximasas?. Sin embargo, existen variantes ?emergentes? que poseen la mutación Asp240Gly y son capaces de conferir resistencia a cefotaxima y ceftazidima simultáneamente. \nEn este trabajo demostramos que la mutación Asp240Gly se asocia a un fenotipo claro de resistencia a ceftazidima sólo cuando clones hiperproductores de Escherichia coli carecían de porinas OmpF en la membrana externa. \nLa sustitución de glicina en la posición 240 no afecta visiblemente la conformación ni la estabilidad de la enzima, lo que se traduce en eficiencias catalíticas conservadas frente a los ?-lactámicos. Sin embargo, otorgaría mayor flexibilidad conformacional a la enzima, de manera tal que ceftazidima podría acomodar su sustituyente voluminoso en la cavidad del sitio activo para ser hidrolizado más eficientemente. Las ?-lactamasas CTX-MAsp240Gly tienen eficiencias catalíticas frente a ceftazidima entre 5 y 15 veces mayores que las de sus respectivas variantes salvajes, aunque éstas continúan siendo por lo menos 200 veces más bajas que las de cefotaxima. \nEs decir que a pesar de ejercer efectos sutiles en el comportamiento cinético, la mutación Asp240Gly puede otorgar una gran ventaja selectiva cuando se combina con impermeabilidad en el ambiente de selección adecuado. \n application/pdf Vay, Carlos Centron, Daniela Vignoli, Rafael ß-lactamasa CTX-M Ceftazidima Mutaciones Hidrólisis spa Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica info:eu-repo/semantics/openAccess http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/ Ciencia de la vida Estudio de las bases bioquímicas y moleculares de la actividad hidrolítica de variantes salvajes y mutacionales de ß-lactamasas CTX-M sobre oximino-cefalosporinas : papel de mutaciones puntuales en la expansión del espectro de hidrólisis info:eu-repo/semantics/doctoralThesis info:ar-repo/semantics/tesis doctoral info:eu-repo/semantics/acceptedVersion http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=posgraafa&cl=CL1&d=HWA_1167 http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/collect/posgraafa/index/assoc/HWA_1167.dir/1167.PDF
institution Universidad de Buenos Aires
institution_str I-28
repository_str R-145
collection Repositorio Digital de la Universidad de Buenos Aires (UBA)
language Español
orig_language_str_mv spa
topic ß-lactamasa
CTX-M
Ceftazidima
Mutaciones
Hidrólisis
Ciencia de la vida
spellingShingle ß-lactamasa
CTX-M
Ceftazidima
Mutaciones
Hidrólisis
Ciencia de la vida
Ghiglione, Bárbara
Estudio de las bases bioquímicas y moleculares de la actividad hidrolítica de variantes salvajes y mutacionales de ß-lactamasas CTX-M sobre oximino-cefalosporinas : papel de mutaciones puntuales en la expansión del espectro de hidrólisis
topic_facet ß-lactamasa
CTX-M
Ceftazidima
Mutaciones
Hidrólisis
Ciencia de la vida
description Most CTX-M producing microorganisms are usually resistant to cefotaxime but susceptible to ceftazidime. Therefore, these enzymes are called "cefotaximases". However, there are emerging variants possessing the Asp240Gly mutation that are able to confer resistance to cefotaxime and ceftazidime simultaneously.\nIn this work we demonstrate that the Asp240Gly mutation is associated with a ceftazidime resistance phenotype only when Escherichia coli hyperproducing clones lacked porin OmpF in the outer membrane.\nSubstitution of glycine at position 240 does not visibly affect the conformation or the stability of the enzyme, resulting in conserved catalytic efficiencies against most ?-lactam antibiotics. However, the mutation leads to a higher conformational flexibility that allows ceftazidime to accommodate its bulky substituent in the active site cavity, so that it can be hydrolysed more efficiently. CTX-MAsp240Gly ?-lactamases have catalytic efficiencies towards ceftazidime between 5 and 15 times higher than those of their respective wild variants, although these are still at least 200 times lower than cefotaxime.\nDespite having subtle effects on the kinetic behavior, the Asp240Gly mutation can provide a selective advantage when combined with low permeability in a suitable selection environment.\n
author2 Power, Pablo
author_facet Power, Pablo
Ghiglione, Bárbara
format Tesis doctoral
Tesis doctoral
acceptedVersion
author Ghiglione, Bárbara
author_sort Ghiglione, Bárbara
title Estudio de las bases bioquímicas y moleculares de la actividad hidrolítica de variantes salvajes y mutacionales de ß-lactamasas CTX-M sobre oximino-cefalosporinas : papel de mutaciones puntuales en la expansión del espectro de hidrólisis
title_short Estudio de las bases bioquímicas y moleculares de la actividad hidrolítica de variantes salvajes y mutacionales de ß-lactamasas CTX-M sobre oximino-cefalosporinas : papel de mutaciones puntuales en la expansión del espectro de hidrólisis
title_full Estudio de las bases bioquímicas y moleculares de la actividad hidrolítica de variantes salvajes y mutacionales de ß-lactamasas CTX-M sobre oximino-cefalosporinas : papel de mutaciones puntuales en la expansión del espectro de hidrólisis
title_fullStr Estudio de las bases bioquímicas y moleculares de la actividad hidrolítica de variantes salvajes y mutacionales de ß-lactamasas CTX-M sobre oximino-cefalosporinas : papel de mutaciones puntuales en la expansión del espectro de hidrólisis
title_full_unstemmed Estudio de las bases bioquímicas y moleculares de la actividad hidrolítica de variantes salvajes y mutacionales de ß-lactamasas CTX-M sobre oximino-cefalosporinas : papel de mutaciones puntuales en la expansión del espectro de hidrólisis
title_sort estudio de las bases bioquímicas y moleculares de la actividad hidrolítica de variantes salvajes y mutacionales de ß-lactamasas ctx-m sobre oximino-cefalosporinas : papel de mutaciones puntuales en la expansión del espectro de hidrólisis
publisher Facultad de Farmacia y Bioquímica
publishDate 2015
url http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=posgraafa&cl=CL1&d=HWA_1167
http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/collect/posgraafa/index/assoc/HWA_1167.dir/1167.PDF
work_keys_str_mv AT ghiglionebarbara estudiodelasbasesbioquimicasymolecularesdelaactividadhidroliticadevariantessalvajesymutacionalesdeßlactamasasctxmsobreoximinocefalosporinaspapeldemutacionespuntualesenlaexpansiondelespectrodehidrolisis
_version_ 1766017458965053440

Ejemplares similares