Caracterización patogénica y molecular de Tritrichomonas foetus aisladas de rodeos bovinos

La trichomonosis bovina (TB) es una enfermedad de transmisión sexual causada por el protozoario Tritrichomonas foetus que afecta la productividad de los rodeos, especialmente de cría, al provocar muerte embrionaria, piómetra y abortos esporádicos. En la presente tesis se plantearon dos objetivos gen...

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Detalles Bibliográficos
Autor principal: Doumecq, María Laura
Formato: Artículo revista
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias 2021
Materias:
Bovinos
Tritrichomonas foetus
Medicina veterinaria
Producción animal
Patología animal
Trichomonosis
Enfermedades de transmisión sexual
Acceso en línea:Doumecq, M. L . (2021). Caracterización patogénica y molecular de Tritrichomonas foetus aisladas de rodeos bovinos [Tesis de doctorado]. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires, Argentina.
Aporte de:
Repositorio Institucional de Acceso Abierto (RIDAA) de Universidad Nacional del Centro
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description La trichomonosis bovina (TB) es una enfermedad de transmisión sexual causada por el protozoario Tritrichomonas foetus que afecta la productividad de los rodeos, especialmente de cría, al provocar muerte embrionaria, piómetra y abortos esporádicos. En la presente tesis se plantearon dos objetivos generales: caracterizar el perfil patogénico y el perfil molecular de T. foetus aisladas demuestras clínicas de bovinos pertenecientes a diferentes establecimientos agropecuarios de la provincia de Buenos Aires. Para el estudio se constituyó un cepario con 114 aislamientos crio preservados de T. foetus de bovinos. Los aislamientos fueron derivados de diferentes laboratorios de la provincia de Buenos Aires. Del cepario constituido, se seleccionaron 26 aislamientos de diferentes regiones ganaderas de la provincia de Buenos Aires. Los aislamientos seleccionados fueron clonados para estudiarlos como clones o cepas, y confirmados por reacción en cadena de la polimerasa (PCR). La puesta a punto de la técnica de clonado nos permitió obtener cepas a partir de primo cultivos y caracterizarlas colonias en medios sólidos observando que todas las cepas en estudio producían la hemólisis de glóbulos rojos bovinos. Los perfiles patogénicos de las cepas de T. foetusse caracterizaron por evaluación de la actividad hemolítica, la producción de absceso subcutáneo en ratones BALB/c, la citoadherencia sobre células vaginales de ratón y células CHO, el efecto citopatogénico (ECP) sobre células CHO y la persistencia de la infección vaginal de ratonas BALB/c. Los resultados de la actividad hemolítica, la citoadherencia y el ECP en línea celular CHO, permitieron categorizar las cepas de T. foetus. La instalación de la infección vaginal en el modelo ratón y la evaluación de su persistencia durante 5 semanas, permitió observar lesiones en el tracto reproductor con persistencia prolongada. Los perfiles moleculares se caracterizaron por determinación del perfil de carbohidratos mediante lectinocito química, determinación del perfil proteico en SDS-PAGE, determinación de la presencia del gen de lacisteín-proteasa 8 (CP8) mediante PCR y utilización de marcadores moleculares para determinar polimorfismo genético entre las cepas. Por SDS-PAGE se observaron perfiles proteicos homogéneos. La presencia del gen de la CP8 se confirmó en la totalidad de las cepas. La posterior secuenciación permitió comprobar la ausencia de polimorfismo tanto en el gen como en su región promotora. La lectinocito química determinó un predominio en las cepas estudiadas de manosa, N-acetil glucosamina y ácido siálico. Los resultados de la caracterización patogénica y molecular presentaron variabilidad entre las cepas de T. foetus estudiadas, sin embargo los marcadores moleculares permitieron identificar dos genotipos definiendo un patrón patogénico vinculado al ECP y la actividad hemolítica. El genotipo BL, al cual pertenecen 21/26 cepas, presentaron marcado ECP y alta actividad hemolítica. El genotipo minoritario B, 5/26 se corresponde con cepas con leve ECP sobre la línea celular CHO y actividad hemolítica baja. Por lo tanto, teniendo en cuenta todos estos resultados, podemos concluir que las cepas de T. foetus obtenidas a partir de muestras clínicas presentan diferencias en las variables en estudio vinculadas con la patogenicidad.
publisher Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias
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