Purificación y caracterización de poligalacturonasas de Aspergillus kawachii

El desarrollo de nuevas aplicaciones de las pectinasas depende de la búsqueda de enzimas que catalizen reacciones novedosas o que presenten propiedades diferentes a las ya estudiadas. Considerando la capacidad de A. kawachii de producir enzimas activas en condiciones de alta acidez y al escaso conoc...

Descripción completa

Guardado en:
Detalles Bibliográficos
Autor principal: Contreras Esquivel, Juan Carlos
Otros Autores: Voget, Claudio Enrique
Formato: Tesis Tesis de doctorado
Lenguaje:Español
Publicado: 2003
Materias:
Ciencias Exactas
Morfología celular
Ciencias Químicas
Enzimas
Acceso en línea:http://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/2373
https://doi.org/10.35537/10915/2373
Aporte de:
SEDICI (UNLP) de Universidad Nacional de La Plata
id I19-R120-10915-2373
record_format dspace
spelling I19-R120-10915-23732025-01-30T14:54:17Z http://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/2373 https://doi.org/10.35537/10915/2373 Purificación y caracterización de poligalacturonasas de Aspergillus kawachii Contreras Esquivel, Juan Carlos 2003 2003 2008-06-23T03:00:00Z Voget, Claudio Enrique es Ciencias Exactas Morfología celular Ciencias Químicas Enzimas El desarrollo de nuevas aplicaciones de las pectinasas depende de la búsqueda de enzimas que catalizen reacciones novedosas o que presenten propiedades diferentes a las ya estudiadas. Considerando la capacidad de A. kawachii de producir enzimas activas en condiciones de alta acidez y al escaso conocimiento de su sistema pectolítico, se inició un proyecto de investigación dirigido a estudiar las pectinasas de este microorganismo. El presente trabajo de Tesis se enmarcó en los objetivos de dicho proyecto y se relacionó con el screening de actividades enzimáticas, la purificación y caracterización de una PGasa activa sobre sustratos solubles e insolubles a valores bajos de pH (2.0-3.0) y su aplicación a la extracción enzimática de pectina y la maceración de tejidos. El trabajo se extendió a la purificación y caracterización de poligalacturonasas no-ácidas y al estudio del fenómeno de adsorción selectiva de estas PGasas a filtros de fibra de vidrio. Dicho fenómeno fué observado durante los estudios preliminares de screening y constituyó un aporte original no previamente contemplado en los objetivos iniciales del proyecto. A continuación se detalla el plan desarrollado en el presente trabajo. - Screening de enzimas pectolíticas (Capítulo 2) Cultivos de A. kawachii en medios líquidos con diferentes fuentes de carbono para el screening de enzimas. Desarrollo de un test en placa y zimograma para detectar actividad frente a RG. Caracterización preliminar de la actividad solubilizadora de pectina. - Purificación y propiedades de una poligalacturonasa ácida (Capítulo 3) Purificación de una PGasa ácida (PGI) parcialmente constitutiva producida en un medio con glucosa. Determinación de sus propiedades fisico-químicas y cinéticas, modo de acción (exo/endo), estabilidad térmica y especificidad de sustrato. - Empleo de poligalacturonasas en procesos de extracción de pectina y maceración de tejidos vegetales (Capítulo 4) Ensayos de maceración de frutas y hortalizas y extracción de pectina de pomaza de limón con la PGI de A. kawachii. Comparación de la pectina extraída enzimáticamente a pH ácido con pectinas extraídas por métodos químicos y con PGasa de A. niger. Adsorción de PGasas no-ácidas de A. kawachii a filtros de fibra de vidrio. - Purificación y propiedades de las PGasas (Capítulo 5) Estudio del fenómeno de adsorción de pectinasas a filtros de fibra de vidrio. Purificación y caracterización de las PGasas involucradas en el proceso de adsorción. Doctor en Ciencias Exactas, área Ciencias Biológicas Universidad Nacional de La Plata Facultad de Ciencias Exactas Tesis Tesis de doctorado http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International (CC BY-NC-SA 4.0) application/pdf
institution Universidad Nacional de La Plata
institution_str I-19
repository_str R-120
collection SEDICI (UNLP)
language Español
topic Ciencias Exactas
Morfología celular
Ciencias Químicas
Enzimas
spellingShingle Ciencias Exactas
Morfología celular
Ciencias Químicas
Enzimas
Contreras Esquivel, Juan Carlos
Purificación y caracterización de poligalacturonasas de Aspergillus kawachii
topic_facet Ciencias Exactas
Morfología celular
Ciencias Químicas
Enzimas
description El desarrollo de nuevas aplicaciones de las pectinasas depende de la búsqueda de enzimas que catalizen reacciones novedosas o que presenten propiedades diferentes a las ya estudiadas. Considerando la capacidad de A. kawachii de producir enzimas activas en condiciones de alta acidez y al escaso conocimiento de su sistema pectolítico, se inició un proyecto de investigación dirigido a estudiar las pectinasas de este microorganismo. El presente trabajo de Tesis se enmarcó en los objetivos de dicho proyecto y se relacionó con el screening de actividades enzimáticas, la purificación y caracterización de una PGasa activa sobre sustratos solubles e insolubles a valores bajos de pH (2.0-3.0) y su aplicación a la extracción enzimática de pectina y la maceración de tejidos. El trabajo se extendió a la purificación y caracterización de poligalacturonasas no-ácidas y al estudio del fenómeno de adsorción selectiva de estas PGasas a filtros de fibra de vidrio. Dicho fenómeno fué observado durante los estudios preliminares de screening y constituyó un aporte original no previamente contemplado en los objetivos iniciales del proyecto. A continuación se detalla el plan desarrollado en el presente trabajo. - Screening de enzimas pectolíticas (Capítulo 2) Cultivos de A. kawachii en medios líquidos con diferentes fuentes de carbono para el screening de enzimas. Desarrollo de un test en placa y zimograma para detectar actividad frente a RG. Caracterización preliminar de la actividad solubilizadora de pectina. - Purificación y propiedades de una poligalacturonasa ácida (Capítulo 3) Purificación de una PGasa ácida (PGI) parcialmente constitutiva producida en un medio con glucosa. Determinación de sus propiedades fisico-químicas y cinéticas, modo de acción (exo/endo), estabilidad térmica y especificidad de sustrato. - Empleo de poligalacturonasas en procesos de extracción de pectina y maceración de tejidos vegetales (Capítulo 4) Ensayos de maceración de frutas y hortalizas y extracción de pectina de pomaza de limón con la PGI de A. kawachii. Comparación de la pectina extraída enzimáticamente a pH ácido con pectinas extraídas por métodos químicos y con PGasa de A. niger. Adsorción de PGasas no-ácidas de A. kawachii a filtros de fibra de vidrio. - Purificación y propiedades de las PGasas (Capítulo 5) Estudio del fenómeno de adsorción de pectinasas a filtros de fibra de vidrio. Purificación y caracterización de las PGasas involucradas en el proceso de adsorción.
author2 Voget, Claudio Enrique
author_facet Voget, Claudio Enrique
Contreras Esquivel, Juan Carlos
format Tesis
Tesis de doctorado
author Contreras Esquivel, Juan Carlos
author_sort Contreras Esquivel, Juan Carlos
title Purificación y caracterización de poligalacturonasas de Aspergillus kawachii
title_short Purificación y caracterización de poligalacturonasas de Aspergillus kawachii
title_full Purificación y caracterización de poligalacturonasas de Aspergillus kawachii
title_fullStr Purificación y caracterización de poligalacturonasas de Aspergillus kawachii
title_full_unstemmed Purificación y caracterización de poligalacturonasas de Aspergillus kawachii
title_sort purificación y caracterización de poligalacturonasas de aspergillus kawachii
publishDate 2003
url http://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/2373
https://doi.org/10.35537/10915/2373
work_keys_str_mv AT contrerasesquiveljuancarlos purificacionycaracterizaciondepoligalacturonasasdeaspergilluskawachii
_version_ 1823259370924802048

Ejemplares similares