Estudio de los efectos de las hormonas tiroideas sobre la expresión y actividad del canal Hv1 en linfomas de células T

Comenzamos este trabajo caracterizando la actividad del canal Hv1 en dos líneas celulares derivadas de PTCLs (HuT78 y Karpas299), motivándonos por reportes previos que indican que la corriente mediada por este canal se encuentra aumentada en la línea celular Jurkat (correspondiente a linfocitos T tu...

Descripción completa

Guardado en:
Detalles Bibliográficos
Autor principal: Alvarado, Lucero Aldana
Otros Autores: Cayrol, María Florencia
Formato: Tesis Tesis de grado
Lenguaje:Español
Publicado: 2024
Materias:
Acceso en línea:http://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/168346
Aporte de:
id I19-R120-10915-168346
record_format dspace
spelling I19-R120-10915-1683462024-08-06T20:08:25Z http://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/168346 Estudio de los efectos de las hormonas tiroideas sobre la expresión y actividad del canal Hv1 en linfomas de células T Alvarado, Lucero Aldana 2024-07-29 2024-08-06T13:52:43Z Cayrol, María Florencia Ventura, Clara es Biología Hormonas tiroideas Canal Hv1 Linfoma Comenzamos este trabajo caracterizando la actividad del canal Hv1 en dos líneas celulares derivadas de PTCLs (HuT78 y Karpas299), motivándonos por reportes previos que indican que la corriente mediada por este canal se encuentra aumentada en la línea celular Jurkat (correspondiente a linfocitos T tumorales), en relación a la corriente observada en en linfocitos T normales. Llamativamente, utilizando la técnica de Patch-Clamp observamos una ausencia de corriente mediada por el canal Hv1 en la línea celular Karpas299, mientras que las células HuT78 presentaron corrientes salientes de H+, dependientes del voltaje y del pH e inhibibles por Cl-GBI, compatibles con corrientes mediadas por el canal Hv1. Esta importante diferencia entre ambas líneas celulares, que no ha sido reportada hasta el momento en literatura, nos llevó a cuestionarnos si la falta de corriente en las células Karpas299 se debía a una ausencia de la expresión del gen HVCN1. Para evaluar esta hipótesis, decidimos caracterizar la expresión del canal Hv1 a nivel transcripcional y proteico tanto en Karpas299 como en HuT78. Los resultados obtenidos demuestran la presencia de ARN mensajero y proteína correspondiente al canal Hv1, en ambas líneas celulares. En concordancia con los resultados obtenidos mediante la técnica de Patch-Clamp, observamos mayores niveles transcripcionales para el gen HVCN1 en las células HuT78 en comparación con las células Karpas299; sin embargo, esta diferencia no se observó al evaluar los niveles proteicos del canal. Debido a que los análisis bioinformáticos realizados sobre las regiones promotoras del gen HVCN1 nos permitieron identificar 3 posibles sitios de unión para los receptores nucleares de HTs, decidimos evaluar los efectos producidos por concentraciones fisiológicas de estas hormonas sobre la expresión del canal Hv1 en ambas líneas celulares, y sobre las corrientes mediadas por el mismo en nuestro modelo de estudio. En este sentido, encontramos que las HTs producen un aumento en la expresión transcripcional del gen HVCN1 en ambas líneas celulares, pero este aumento no se ve reflejado en los niveles de proteína ni en la corriente mediada por el canal. Licenciado en Biotecnología y Biología Molecular Universidad Nacional de La Plata Facultad de Ciencias Exactas Tesis Tesis de grado http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International (CC BY-NC-ND 4.0) application/pdf
institution Universidad Nacional de La Plata
institution_str I-19
repository_str R-120
collection SEDICI (UNLP)
language Español
topic Biología
Hormonas tiroideas
Canal Hv1
Linfoma
spellingShingle Biología
Hormonas tiroideas
Canal Hv1
Linfoma
Alvarado, Lucero Aldana
Estudio de los efectos de las hormonas tiroideas sobre la expresión y actividad del canal Hv1 en linfomas de células T
topic_facet Biología
Hormonas tiroideas
Canal Hv1
Linfoma
description Comenzamos este trabajo caracterizando la actividad del canal Hv1 en dos líneas celulares derivadas de PTCLs (HuT78 y Karpas299), motivándonos por reportes previos que indican que la corriente mediada por este canal se encuentra aumentada en la línea celular Jurkat (correspondiente a linfocitos T tumorales), en relación a la corriente observada en en linfocitos T normales. Llamativamente, utilizando la técnica de Patch-Clamp observamos una ausencia de corriente mediada por el canal Hv1 en la línea celular Karpas299, mientras que las células HuT78 presentaron corrientes salientes de H+, dependientes del voltaje y del pH e inhibibles por Cl-GBI, compatibles con corrientes mediadas por el canal Hv1. Esta importante diferencia entre ambas líneas celulares, que no ha sido reportada hasta el momento en literatura, nos llevó a cuestionarnos si la falta de corriente en las células Karpas299 se debía a una ausencia de la expresión del gen HVCN1. Para evaluar esta hipótesis, decidimos caracterizar la expresión del canal Hv1 a nivel transcripcional y proteico tanto en Karpas299 como en HuT78. Los resultados obtenidos demuestran la presencia de ARN mensajero y proteína correspondiente al canal Hv1, en ambas líneas celulares. En concordancia con los resultados obtenidos mediante la técnica de Patch-Clamp, observamos mayores niveles transcripcionales para el gen HVCN1 en las células HuT78 en comparación con las células Karpas299; sin embargo, esta diferencia no se observó al evaluar los niveles proteicos del canal. Debido a que los análisis bioinformáticos realizados sobre las regiones promotoras del gen HVCN1 nos permitieron identificar 3 posibles sitios de unión para los receptores nucleares de HTs, decidimos evaluar los efectos producidos por concentraciones fisiológicas de estas hormonas sobre la expresión del canal Hv1 en ambas líneas celulares, y sobre las corrientes mediadas por el mismo en nuestro modelo de estudio. En este sentido, encontramos que las HTs producen un aumento en la expresión transcripcional del gen HVCN1 en ambas líneas celulares, pero este aumento no se ve reflejado en los niveles de proteína ni en la corriente mediada por el canal.
author2 Cayrol, María Florencia
author_facet Cayrol, María Florencia
Alvarado, Lucero Aldana
format Tesis
Tesis de grado
author Alvarado, Lucero Aldana
author_sort Alvarado, Lucero Aldana
title Estudio de los efectos de las hormonas tiroideas sobre la expresión y actividad del canal Hv1 en linfomas de células T
title_short Estudio de los efectos de las hormonas tiroideas sobre la expresión y actividad del canal Hv1 en linfomas de células T
title_full Estudio de los efectos de las hormonas tiroideas sobre la expresión y actividad del canal Hv1 en linfomas de células T
title_fullStr Estudio de los efectos de las hormonas tiroideas sobre la expresión y actividad del canal Hv1 en linfomas de células T
title_full_unstemmed Estudio de los efectos de las hormonas tiroideas sobre la expresión y actividad del canal Hv1 en linfomas de células T
title_sort estudio de los efectos de las hormonas tiroideas sobre la expresión y actividad del canal hv1 en linfomas de células t
publishDate 2024
url http://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/168346
work_keys_str_mv AT alvaradoluceroaldana estudiodelosefectosdelashormonastiroideassobrelaexpresionyactividaddelcanalhv1enlinfomasdecelulast
_version_ 1807223681810694144