Leucosis enzoótica bovina: evaluación de técnicas de diagnóstico (ID, ELISA-I, WB, PCR) en bovinos inoculados experimentalmente
Se diseñaron dos experiencias utilizando un total de 12 bovinos (8 inoculados y 4 controles) de 2 años de edad. La transmisión de la infección con virus de la Leucosis Bovina (VLB) se llevó a cabo a partir de 5, 10 o 50 µl de sangre total periférica de bovinos seropositivos asintomáticos, utilizando...
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Publicado: |
2001
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Ciencias Veterinarias leucosis bovina; ID; ELISA-I; WB; PCR Técnicas y Procedimientos Diagnósticos Bovinos bovine Leukosis; AGID; I-ELISA; WB; PCR González, Ester Teresa Oliva, Graciela A. Valera, Alejandro Rafael Bonzo, Estela Licursi, María Etcheverrigaray, María Elisa Leucosis enzoótica bovina: evaluación de técnicas de diagnóstico (ID, ELISA-I, WB, PCR) en bovinos inoculados experimentalmente |
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Se diseñaron dos experiencias utilizando un total de 12 bovinos (8 inoculados y 4 controles) de 2 años de edad. La transmisión de la infección con virus de la Leucosis Bovina (VLB) se llevó a cabo a partir de 5, 10 o 50 µl de sangre total periférica de bovinos seropositivos asintomáticos, utilizando distintas vías: intradérmica, subcutánea, intramuscular o endovenosa. Se realizó el seguimiento semanal en ambas experiencias, durante 4 meses cada una, obteniendo los siguientes resultados. ELISA indirecto (ELISA-I): la detección de anticuerpos se comprobó en todos los animales entre la 3º y 6º semana posinfección (PI). Inmunodifusión en agar (ID): todos los animales inoculados dieron positivos entre la 4º y 6º semana, manteniéndose débiles positivos el 40% de los animales hasta la 6º semana PI. Western Blot (WB): los sueros positivos mostraron reactividad para la gp51 y la p24. Otras proteínas (gp30, p15, p12 y p10) no fueron detectadas en ningún caso. En el 90% de los bovinos inoculados, los anticuerpos contra la p24 se detectaron antes (2º-4º semana PI) que los anticuerpos contra la gp51. PCR: Una nested PCR fue desarrollada con primers para un segmento conservado del gen env. El 75% de los bovinos fueron positivos a la 2º semana PI. Conclusión: 1) Todos los animales inoculados, aún con mínimo volumen de sangre (5 µl) y por cualquiera de las vías, dieron positivo a las técnicas aplicadas. 2) Las pruebas ID y ELISA-I son de especial utilidad en estudios poblacionales, con mayor sensibilidad esta última. 3) Las técnicas de WB y PCR se consideran alternativas para los casos en que se requiera confirmación. |
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