Reconocimiento selectivo sensor/operador en reguladores de respuesta a metales monovalentes en Salmonella enterica

Dos reguladores transcripcionales parálogos de la familia MerR, CueR y GolS, son responsables de la detección y la resistencia a iones de metales monovalentes en Salmonella enterica. A pesar de que presentan un grado de similitud alto en su secuencia proteica y en la secuencia nucleotídica de sus op...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor principal: Humbert, María Victoria
Otros Autores: Soncini, Fernando C.
Formato: doctoralThesis Tésis de Doctorado acceptedVersion
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. 2017
Materias:
Reguladores MerR
Regulación transcripcional
Cobre
Acceso en línea:http://hdl.handle.net/2133/10334
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Aporte de:
Repositorio Hipermedial de la Universidad Nacional de Rosario (UNR) de Universidad Nacional de Rosario
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description Dos reguladores transcripcionales parálogos de la familia MerR, CueR y GolS, son responsables de la detección y la resistencia a iones de metales monovalentes en Salmonella enterica. A pesar de que presentan un grado de similitud alto en su secuencia proteica y en la secuencia nucleotídica de sus operadores blanco, estas proteínas difieren en la naturaleza de la señal que reconocen así como en el conjunto de genes cuya transcripción regulan. Recientemente, en el laboratorio donde se desarrolló esta Tesis se demostró que el reconocimiento selectivo de secuencias promotoras depende de la presencia de bases específicas localizadas en las posiciones 3´ y 3 de los operadores reconocidos por estos reguladores. En el primer Capítulo de la presente Tesis demostramos que el residuo de metionina en la posición 16 de GolS, absolutamente conservado entre proteínas homólogas a este regulador pero ausente en todos los xenólogos del tipo CueR, es clave para el reconocimiento selectivo de secuencias promotoras que presentan la marca distintiva de todos los operadores regulados por GolS, en tanto que el residuo en la posición 19 auxilia en la interacción específica sensor/operador; y que el reemplazo de estos residuos por los conservados en el regulador parálogo cambia el conjunto de genes reconocidos por estos factores transcripcionales. A su vez, demostramos que existe una actividad regulatoria diferencial entre CueR de Salmonella, CueR STM, y su ortólogo de E. coli, CueREC, probablemente debido a diferencias sutiles en el dominio N-terminal de unión al ADN. Estos resultados indican que la co-evolución de un regulador y sus operadores blanco dentro de la célula bacteriana provee de las condiciones necesarias para evitar el reconocimiento cruzado y garantizar la respuesta adecuada al daño provocado por un estresante dado, en este caso un ión metálico. Finalmente, iniciamos la caracterización de otro regulador transcripcional MerR, específico de Salmonella y homólogo a MlrA, implicado en la regulación de la motilidad en y la formación de biopelículas. Los resultados que se describen en el segundo Capítulo de esta Tesis demuestran que altos niveles de STM1266 disminuyen la motilidad, incrementan la producción y secreción de celulosa, confieren mayor resistencia a estreptomicina y estimulan la formación de biopelículas, posiblemente debido a la participación de este regulador en la modulación transcripcional de csgD.
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