Determinación molecular de agentes bacterianos difíciles de cultivar en semen bovino criopreservado de origen comercial

El objetivo del presente trabajo fue determinar la presencia de genes de Mycoplasma spp., Chlamydia spp. y Ureaplasma spp. en muestras de semen bovino criopreservado de origen comercial mediante la técnica molecular de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), y correlacionar la presencia de los mi...

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Autor principal: Morales, Lucila Belén
Otros Autores: Alustiza, Fabrisio
Formato: Tesis de grado acceptedVersion
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad Nacional del Noroeste de la provincia de Buenos Aires 2022
Materias:
Determinación molecular
Agentes bacterianos
Semen bovino
Criopreservado
Acceso en línea:https://repositorio.unnoba.edu.ar:8080/xmlui/handle/23601/288
Aporte de:
Re DI Repositorio Digital UNNOBA de Universidad Nacional del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires
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spelling I103-R405-23601-2882022-04-01T18:19:15Z Determinación molecular de agentes bacterianos difíciles de cultivar en semen bovino criopreservado de origen comercial Morales, Lucila Belén Alustiza, Fabrisio Manes, Jorgelina Iglesias, Juliana Determinación molecular Agentes bacterianos Semen bovino Criopreservado El objetivo del presente trabajo fue determinar la presencia de genes de Mycoplasma spp., Chlamydia spp. y Ureaplasma spp. en muestras de semen bovino criopreservado de origen comercial mediante la técnica molecular de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), y correlacionar la presencia de los mismos con ciertos parámetros de calidad seminal. Para ello se utilizaron 94 pajuelas de semen bovino criopreservadas de origen comercial, provenientes de 60 toros de 7 centros de reproducción. Las muestras almacenadas en nitrógeno líquido fueron descongeladas y se determinó la movilidad espermática total (MET) y movilidad rectilínea progresiva (MRP) en dos tiempos (T1: momento de descongelación y T2: 120 minutos post-descongelación). La integridad de la membrana plasmática (IMP) se evaluó usando tinción eosina y nigrosina. La funcionalidad de la membrana plasmática (FMP) del compartimiento flagelar se determinó mediante el test de endósmosis (Hos-Test). Se extrajo el ADN de cada pajuela para la detección molecular de los genes correspondientes a Mycoplasma bovis, Mycoplasma bovigenitalium, Mycoplasma californicum, Ureaplasma diversum y Chlamydia spp. mediante el empleo de técnicas de PCR con primers específicos, utilizando un termociclador (BioRad). Al finalizar las reacciones de PCR, se realizó una corrida electroforética en geles de agarosa al 2%, y se empleó bromuro de etidio para observar los amplicones bajo un transiluminador UV-Visible. Se determinó la presencia de Mycoplasma californicum en 41% (38/94) de las muestras, de Mycoplasma bovigenitalium en 22% (21/91), Ureaplasma diversum en 11% (11/94), Chlamydia spp 23S en el 47% (44/94) y Chlamydia spp. 16S en 7% (7/94). No se detectó la presencia de la secuencia génica de Mycoplasma bovis. Se observó una tendencia de que la presencia de genes de U. diversum afecta negativamente la movilidad espermática total y la movilidad rectilínea progresiva sin afectar los demás parámetros. La presencia de genes de M. californicum, M. bovigenitalium y Chlamydia spp. (16S y 23S) en las pajuelas analizadas no afectó las variables de calidad seminal en ninguno de los tiempos evaluados. Se concluye que es posible detectar genes correspondientes a Mycoplasma californicum, Mycoplasma bovigenitalium, Ureaplasma diversum y Chlamydia spp. (genes 23S y 16S) en semen bovino criopreservado de origen comercial, y que la presencia de Ureaplasma diversum podría ser capaz de afectar los parámetros de motilidad seminal en las muestras de semen criopreservado analizadas. Fil: Morales, Lucila Belén. Universidad Nacional del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires. Escuela de Ciencias Agrarias, Naturales y Ambientales; Argentina. Licenciatura en Genética 2022-04-01T18:18:33Z 2022-04-01T18:18:33Z 2022-02-23 info:eu-repo/semantics/bachelorThesis info:ar-repo/semantics/tesis de grado info:eu-repo/semantics/acceptedVersion info:eu-repo/semantics/bachelorThesis info:ar-repo/semantics/tesis de grado info:eu-repo/semantics/acceptedVersion info:eu-repo/semantics/bachelorThesis info:ar-repo/semantics/tesis de grado info:eu-repo/semantics/acceptedVersion https://repositorio.unnoba.edu.ar:8080/xmlui/handle/23601/288 spa info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/ application/pdf 59 p. application/pdf Universidad Nacional del Noroeste de la provincia de Buenos Aires
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