Development of RT-nested-PCR protocols to detect respiratory syncytial virus (RSV) in children in Córdoba during 2024-2025

Las Infecciones agudas respiratorias altas por VRS, representan una de las mayores causas de morbi-mortalidad en el mundo, mientras que las IRAs bajas por VRS lo son para niños pequeños, ancianos y pacientes inmunocomprometidos o con enfermedades crónicas. Las edades van desde 4 años con positivid...

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Detalles Bibliográficos
Autores principales: Luti, M., Desimone , M., Cervella , L., Cámara, J, Rupil, L, Frutos, M, García Oro , C, Cámara, A
Formato: Artículo revista
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad Nacional Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas. Secretaria de Ciencia y Tecnología 2025
Materias:
RSV
subtyping
molecular biology
development
vaccine
VRS
subtipificación
biología molecular puesta a punto
vacuna
Acceso en línea:https://revistas.unc.edu.ar/index.php/med/article/view/50350
Aporte de:
Revista de la Facultad de Ciencias Médicas de Córdoba de Universidad Nacional de Córdoba
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description Las Infecciones agudas respiratorias altas por VRS, representan una de las mayores causas de morbi-mortalidad en el mundo, mientras que las IRAs bajas por VRS lo son para niños pequeños, ancianos y pacientes inmunocomprometidos o con enfermedades crónicas. Las edades van desde 4 años con positividad elevada y adultos mayores. El objetivo fue ajustar la técnica RTnestedPCR para tipificar VRSA y VRSB, a partir de muestras de niños internados, previamente positivos por IFD en HIM-Córdoba. Por el tiempo y el trabajo demandado para el InViV-FCM la puesta a punto, se transformó en una implementación laborioso e interesante. Es un estudio bianual, descriptivo, cumple con aspectos éticos aprobados por CIEIS-HIM y COEIS con consentimiento/asentimiento informado. Hubo 864 muestras de niños internados en 2024 y en lo que va del 2025, son 409 muestras. Para la implementación de la RTnestedPCR se consideraron varios protocolos con múltiples ajustes en T° de anneling, cambio de primers, Tiempo y número de ciclado, se presentan resultados en bajo n muestral, se continúan las detecciones y los ajustes metodológicos. Los resultados obtenidos por el HIM en 2024, de 864 muestras, 189 positivas para VRS por IFD, cuya prevalencia fue 21,9%.  En InViV por RTnestedPCR dieron 2 VRS tipo B y 1 tipo A. En 2025, 409 muestras, 113 positivas para VRS por IFD con prevalencia de 27,6%.  En InViV por RTnestedPCR dieron 2 VRS tipo A y 1 tipo B.  Los resultados permitieron visualizar bandas correspondientes a los subtipos VRSA y VRSB en escasas muestras probadas, confirmando su circulación en 2024-2025. Se seguirán detectando estos subtipos en nuestra región, obteniendo prevalencias, por la importancia en su patogenicidad e impacto en la salud de los niños internados y permitiendo conocer las variabilidades genéticas que circulan. Está previsto realizar el análisis filogenético a futuro, con mayor n muestral. Además, analizar la influencia de la vacunación de VRS en madres gestantes en años bisagras, si implicó menor/mayor infección, enfermedad en recién nacidos, para aportar a la mejora de la formulación y adaptación de la vacuna de VRS. 
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El objetivo fue ajustar la técnica RTnestedPCR para tipificar VRSA y VRSB, a partir de muestras de niños internados, previamente positivos por IFD en HIM-Córdoba. Por el tiempo y el trabajo demandado para el InViV-FCM la puesta a punto, se transformó en una implementación laborioso e interesante. Es un estudio bianual, descriptivo, cumple con aspectos éticos aprobados por CIEIS-HIM y COEIS con consentimiento/asentimiento informado. Hubo 864 muestras de niños internados en 2024 y en lo que va del 2025, son 409 muestras. Para la implementación de la RTnestedPCR se consideraron varios protocolos con múltiples ajustes en T° de anneling, cambio de primers, Tiempo y número de ciclado, se presentan resultados en bajo n muestral, se continúan las detecciones y los ajustes metodológicos. Los resultados obtenidos por el HIM en 2024, de 864 muestras, 189 positivas para VRS por IFD, cuya prevalencia fue 21,9%.  En InViV por RTnestedPCR dieron 2 VRS tipo B y 1 tipo A. En 2025, 409 muestras, 113 positivas para VRS por IFD con prevalencia de 27,6%.  En InViV por RTnestedPCR dieron 2 VRS tipo A y 1 tipo B.  Los resultados permitieron visualizar bandas correspondientes a los subtipos VRSA y VRSB en escasas muestras probadas, confirmando su circulación en 2024-2025. Se seguirán detectando estos subtipos en nuestra región, obteniendo prevalencias, por la importancia en su patogenicidad e impacto en la salud de los niños internados y permitiendo conocer las variabilidades genéticas que circulan. Está previsto realizar el análisis filogenético a futuro, con mayor n muestral. Además, analizar la influencia de la vacunación de VRS en madres gestantes en años bisagras, si implicó menor/mayor infección, enfermedad en recién nacidos, para aportar a la mejora de la formulación y adaptación de la vacuna de VRS.  Acute upper respiratory infections RSV are one of the leading causes of morbi-mortality worldwide, while lower respiratory infections RSV are a significant cause of morbi-mortality in young children, the elderly, and immunocompromised patients or those with chronic illnesses. The ages range from 4 years old with high positivity to older adults. The the aim of this study was to adjust the RTnestedPCR technique to type VRSA and VRSB, from samplescollected from hospitalized children,who previously tested positive by IFD at HIM-Córdoba. Due to the time and work required for InViV-FCM, the implementation the implementation became laborious but scientifically valuable. It is a biannual, descriptive study that was conducted in accordance with ethical standards approved by CIEIS-HIM and COEIS with informed consent/assent. There were 864 samples collected from hospitalized children in 2024 and 409 samples have been collected so far in 2025. For the implementation of RT-nested-PCR, serveral protocols were tested, with multiple adjustments in annealing, temperature, primer changes, cycling time and number. Results were presented with low sample (n), and detections and methodological adjustments continue. Of the 864 samples analyzed by the HIM in 2024, 189 were positive for RSV by IFD, with a prevalence of 21.9%. InViV by RT-nested-PCR, 2 RSV type B and 1 type A were found. In 2025, 409 samples were positive for RSV, 113 of which were positive by IFD, with a prevalence of 27.6%. InViV by RT-Nested-PCR, 2 RSV type A and 1 type B were found. The results allowed the visualization of bands corresponding to the VRSA and VRSB subtypes in a few samples tested, confirming their circulation in 2024-2025.  These subtypes will continue to be detected in our region, obtaining prevalence figures due to their significant pathogenicity and impact on the health of hospitalized children. This will also allow us to understand the circulating genetic variability. Phylogenetic analysis with a larger sample size is planned for the future. Furthermore, we analyzed the impact of RSV vaccination on pregnant mothers in pivotal years, whether it resulted in lower/higher infection and disease in newborns, in order to contribute to improving the formulation and adaptation of the RSV vaccine. . Universidad Nacional Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas. Secretaria de Ciencia y Tecnología 2025-11-12 info:eu-repo/semantics/article info:eu-repo/semantics/publishedVersion application/pdf https://revistas.unc.edu.ar/index.php/med/article/view/50350 Revista de la Facultad de Ciencias Médicas de Córdoba.; Vol. 82 (2025): Suplemento JIC XXVI Revista de la Facultad de Ciencias Médicas de Córdoba; Vol. 82 (2025): Suplemento JIC XXVI Revista da Faculdade de Ciências Médicas de Córdoba; v. 82 (2025): Suplemento JIC XXVI 1853-0605 0014-6722 spa https://revistas.unc.edu.ar/index.php/med/article/view/50350/50522 Derechos de autor 2025 Universidad Nacional de Córdoba https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0

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