Proteínas inmunogénicas y vesículas de membrana de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis para estandarización de pruebas inmunodiagnósticadas

La paratuberculosis (PTBC) es una enteritis granulomatosa crónica, enfermedad infecciosa causada por Mycobacterium avium subespecie paratuberculosis (MAP). Afecta a rumiantes domésticos y a una gran variedad de especies, siendo la fuente de infección los animales clínicamente enfermos como también s...

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Detalles Bibliográficos
Autor principal: Tieri, Silvina
Otros Autores: Mundo, Silva (co-dir.)
Formato: Tesis Libro
Lenguaje:Español
Publicado: Balcarce, Buenos Aires : Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias, 2025
Materias:
Paratuberculosis
ELISA
Proteína p35
Antígeno
Inmunodiagnóstico
Acceso en línea:Descargar pdf
Aporte de:Registro referencial: Solicitar el recurso aquí
Biblioteca UIB (Unidad integrada Balcarce) de Universidad Nacional de Mar del Plata (UNMdP)
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502 |a Trabajo de tesis para ser presentado como requisito parcial para optar al título de Doctor en Ciencias Agrarias, área Producción y Sanidad Animal. 
504 |a Bibliografía : p.81-105. 
520 3 |a La paratuberculosis (PTBC) es una enteritis granulomatosa crónica, enfermedad infecciosa causada por Mycobacterium avium subespecie paratuberculosis (MAP). Afecta a rumiantes domésticos y a una gran variedad de especies, siendo la fuente de infección los animales clínicamente enfermos como también subclínicos. El diagnóstico de la PTBC representa un desafío debido a que la efectividad de las pruebas depende del estadio clínico en el que se encuentre el animal. El ELISA comercial detecta anticuerpos de MAP presentes en sangre o leche, además de tener un alto costo, tiene limitaciones en la sensibilidad y especificidad, dependiendo los resultados de la evolución de la enfermedad. Por lo tanto, es fundamental identificar nuevos antígenos para mejorar el diagnóstico. En este trabajo de tesis doctoral se buscó mejorar el diagnóstico serológico de la PTBC bovina. Para ello, se desarrollaron pruebas de ELISA con la proteína p35 de MAP recombinante, antígenos obtenidos mediante la sonicación de las cepas nativas B35 e I47 y vesículas de secreción. Para la evaluación de los ELISA se incluyeron muestras de bovinos infectados con MAP o no infectados: en forma experimental (n=12) y natural (n=394). Los resultados obtenidos mediante estos nuevos antígenos se compararon con dos ELISAs que se utilizan de rutina con reactivos de importación (PPA-3 y kit comercial) y con el cultivo de materia fecal. Todos los animales con signos clínicos e infectados naturalmente (17,77%) resultaron positivos al cultivo fecal en el medio Herrold suplementado con micobactina. De los animales infectados experimentalmente, se logró un aislamiento de MAP al día 3 (eliminador pasivo) en el grupo infectado con la cepa B35 en el medio Middlebrook 7H11. El punto de corte para el ELISA utilizando como antígeno la p35 fue 21,86%P, la sensibilidad 78,60% y especificidad del 80,50%. La concordancia fue moderada (k=0,43) al comparar con el ELISA PPA-3, débil (k=0,32) con el ELISA comercial y moderada (k=0,46) con el cultivo fecal. Para el ELISA B35 sonicada, el punto de corte fue de 8,71%P, la sensibilidad del 84,29% y la especificidad del 85,49%. La concordancia fue moderada (k=0,54) al comparar con el PPA-3 y con el ELISA comercial y moderada (k=0,57) con el cultivo fecal. Para el ELISA I47 sonicada, el punto de corte fue de 8,85 %P, la sensibilidad del 84,29% y una especificidad de 96,60%. La especificidad fue la mayor de los ELISAs evaluados. La concordancia fue sustancial (k=0,74 y k=0,73) al comparar con el PPA-3 y con el ELISA comercial y casi perfecta (k=0,80) con el cultivo fecal. En los ELISA desarrollados con las vesículas no se observaron diferencias significativas entre los sueros positivos y negativos. Se obtuvieron 128 sueros de los animales desafiados experimentalmente. El 53,90% resultaron positivos con ELISA p35 (33,30% pertenecientes a animales control no desafiados), el 3,90% con ELISA B35 (20% pertenecientes a animales control no desafiados) y un 1,50% con ELISA I47 (50% pertenecientes a animales control no desafiados). El ELISA PPA-3 detectó un 16,40% (23,80% pertenecientes a animales control no desafiados), mientras que el ELISA comercial solo detectó el 1,5% de los animales infectados de manera experimental durante los 24 meses del estudio. Se demostró entonces que, la p35 no mejoró la detección de bovinos con PTBC. Sin embargo, los resultados obtenidos demostraron que, los antígenos sonicados con cepas locales (especialmente del aislamiento I47), podrían utilizarse en el diagnóstico de rutina para el control de PTBC reduciendo así los costos del diagnóstico y prescindiendo de un kit importado. 
541 |3 TESIS POSTGRADO 
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700 1 |9 31122  |a Paolicchi, Fernándo  |e dir. 
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856 |u https://biblio6.mdp.edu.ar/cgi-bin/koha/opac-retrieve-file.pl?id=277c31d756a7e1106cd2e785be733375  |y Descargar pdf 
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945 |a 4  |d Ma. Leandra López de Armentia  |c 2  |b José Luis Cífala 
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