Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli

Mostrar todas las versiones(3)

La glucógeno sintetasa (GS) de Escherichia coli es una glicosiltransferasa que transfiereglucosas desde la ADP-glucosa (ADP-Glc) hacia el extremo no reductor del glucógeno,reteniendo la configuración anomérica. En el presente trabajo, se identificó mediante técnicasde modificación química y mutagéne...

Descripción completa

Guardado en:
Detalles Bibliográficos
Autor principal: Yep Rodríguez, Alejandra
Otros Autores: Preiss, Jack
Formato: Tesis doctoral publishedVersion
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales 2004
Materias:
GLUCOGENO
GLUCOGENO SINTETASA
GLGA
GLICOSILTRANSFERASA
ALMIDON
GT-B
GLYCOGEN
GLYCOGEN SYNTHASE
GLYCOSYLTRANSFERASE
STARCH
Acceso en línea:https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3769_YepRodriguez
https://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n3769_YepRodriguez_oai
Aporte de:
Repositorio Digital de la Universidad de Buenos Aires (UBA) de Universidad de Buenos Aires
id I28-R145-tesis_n3769_YepRodriguez_oai
record_format dspace
spelling I28-R145-tesis_n3769_YepRodriguez_oai2024-09-02 Preiss, Jack Yep Rodríguez, Alejandra 2004 La glucógeno sintetasa (GS) de Escherichia coli es una glicosiltransferasa que transfiereglucosas desde la ADP-glucosa (ADP-Glc) hacia el extremo no reductor del glucógeno,reteniendo la configuración anomérica. En el presente trabajo, se identificó mediante técnicasde modificación química y mutagénesis sitio-dirigida una zona conservada entre las GSbacterianas y almidón sintetasas involucrada en catálisis y unión de sustratos. Posteriormente,se generó un modelo de homología de la GS de E. coli basándose en la estructura deotras tres glicosiltransferasas con un mismo tipo de fold GT-B. La comparación entre las estructurasde las glicosiltransferasas cristalizadas y el modelo de homología llevó a la identificaciónde un grupo de residuos conservados compartiendo una misma topología. Las mutaciones E377A, D137A, R3OOA,K305A y H161A disminuyeron la actividad específica 10000, 8100, 2600, 1200 y 710 veces, respectivamente. Ninguna de las mutaciones aumentóel S0.5; para el glucógeno, y sólo H161A y R300A mostraron S0.5; aumentados para la ADP-Glc en ll y 8 veces, respectivamente. Estos residuos resultaron esenciales para lacatálisis enzimática, validando el modelo que muestra una importante similitud en el sitioactivo de GS de E. coli y otras glicosiltransferasas con un fold GT-B cristalizadas hasta lafecha. Asimismo, se identificaron con técnicas de modelado y se estudiaron otros residuosconservados que tienen una participación potencial en la unión de la ADP-Glc y elglucógeno. Esta es la primera vez que se estudia detalladamente el sitio activo de una GSbacteriana. Fil: Yep Rodríguez, Alejandra. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. application/pdf https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3769_YepRodriguez spa Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar GLUCOGENO GLUCOGENO SINTETASA GLGA GLICOSILTRANSFERASA ALMIDON GT-B GLYCOGEN GLYCOGEN SYNTHASE GLGA GLYCOSYLTRANSFERASE STARCH GT-B Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli Structure-function relationships in the Escherichia coli glycogen synthase info:eu-repo/semantics/doctoralThesis info:ar-repo/semantics/tesis doctoral info:eu-repo/semantics/publishedVersion https://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n3769_YepRodriguez_oai
institution Universidad de Buenos Aires
institution_str I-28
repository_str R-145
collection Repositorio Digital de la Universidad de Buenos Aires (UBA)
language Español
orig_language_str_mv spa
topic GLUCOGENO
GLUCOGENO SINTETASA
GLGA
GLICOSILTRANSFERASA
ALMIDON
GT-B
GLYCOGEN
GLYCOGEN SYNTHASE
GLGA
GLYCOSYLTRANSFERASE
STARCH
GT-B
spellingShingle GLUCOGENO
GLUCOGENO SINTETASA
GLGA
GLICOSILTRANSFERASA
ALMIDON
GT-B
GLYCOGEN
GLYCOGEN SYNTHASE
GLGA
GLYCOSYLTRANSFERASE
STARCH
GT-B
Yep Rodríguez, Alejandra
Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli
topic_facet GLUCOGENO
GLUCOGENO SINTETASA
GLGA
GLICOSILTRANSFERASA
ALMIDON
GT-B
GLYCOGEN
GLYCOGEN SYNTHASE
GLGA
GLYCOSYLTRANSFERASE
STARCH
GT-B
description La glucógeno sintetasa (GS) de Escherichia coli es una glicosiltransferasa que transfiereglucosas desde la ADP-glucosa (ADP-Glc) hacia el extremo no reductor del glucógeno,reteniendo la configuración anomérica. En el presente trabajo, se identificó mediante técnicasde modificación química y mutagénesis sitio-dirigida una zona conservada entre las GSbacterianas y almidón sintetasas involucrada en catálisis y unión de sustratos. Posteriormente,se generó un modelo de homología de la GS de E. coli basándose en la estructura deotras tres glicosiltransferasas con un mismo tipo de fold GT-B. La comparación entre las estructurasde las glicosiltransferasas cristalizadas y el modelo de homología llevó a la identificaciónde un grupo de residuos conservados compartiendo una misma topología. Las mutaciones E377A, D137A, R3OOA,K305A y H161A disminuyeron la actividad específica 10000, 8100, 2600, 1200 y 710 veces, respectivamente. Ninguna de las mutaciones aumentóel S0.5; para el glucógeno, y sólo H161A y R300A mostraron S0.5; aumentados para la ADP-Glc en ll y 8 veces, respectivamente. Estos residuos resultaron esenciales para lacatálisis enzimática, validando el modelo que muestra una importante similitud en el sitioactivo de GS de E. coli y otras glicosiltransferasas con un fold GT-B cristalizadas hasta lafecha. Asimismo, se identificaron con técnicas de modelado y se estudiaron otros residuosconservados que tienen una participación potencial en la unión de la ADP-Glc y elglucógeno. Esta es la primera vez que se estudia detalladamente el sitio activo de una GSbacteriana.
author2 Preiss, Jack
author_facet Preiss, Jack
Yep Rodríguez, Alejandra
format Tesis doctoral
Tesis doctoral
publishedVersion
author Yep Rodríguez, Alejandra
author_sort Yep Rodríguez, Alejandra
title Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli
title_short Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli
title_full Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli
title_fullStr Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli
title_full_unstemmed Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli
title_sort relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de escherichia coli
publisher Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
publishDate 2004
url https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3769_YepRodriguez
https://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n3769_YepRodriguez_oai
work_keys_str_mv AT yeprodriguezalejandra relacionesentreestructurayfuncionenlaglucogenosintetasadeescherichiacoli
AT yeprodriguezalejandra structurefunctionrelationshipsintheescherichiacoliglycogensynthase
_version_ 1824355347712704512

Ejemplares similares