articipación del citoesqueleto de actina en etapas tempranas de la infección del virus Rio Negro
El complejo de Encefalitis Equina Venezolana (VEE), género Alphavirus, incluye virus transmitidos por mosquitos que causan brotes periódicos en América del Sur, en caballos y humanos. Dentro del complejo se encuentra el virus Rio Negro (RNV), cuya circulación ha sido reportada en el centro y norte...
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| Formato: | Artículo revista |
| Lenguaje: | Español |
| Publicado: |
Universidad Nacional Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas. Secretaria de Ciencia y Tecnología
2025
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| Materias: | |
| Acceso en línea: | https://revistas.unc.edu.ar/index.php/med/article/view/50576 |
| Aporte de: |
| Sumario: | El complejo de Encefalitis Equina Venezolana (VEE), género Alphavirus, incluye virus transmitidos por mosquitos que causan brotes periódicos en América del Sur, en caballos y humanos. Dentro del complejo se encuentra el virus Rio Negro (RNV), cuya circulación ha sido reportada en el centro y norte de nuestro país, lo que resalta la importancia de estudiar estos virus con relevancia médica-veterinaria. El objetivo de este trabajo fue estudiar la participación del mecanismo de macropinocitosis en la internalización del RNV en células Vero, haciendo énfasis, en la participación del citoesqueleto de actina.
Para ello, se fijaron monocapas de células Vero infectadas con RNV (MOI 0,1), a las 4, 8, 12 y 24 hpi y procesaron para inmunofluorescencia utilizando un anticuerpo anti-RNV y Phalloidina/Rhodamina (actina). Asimismo, se emplearon Citochalasina D (CytD) o Jasplakinolide (Jpk), que estabilizan o desestabilizan los microfilamentos, respectivamente. Luego de evaluar la viabilidad celular, se pretrataron monocapas con 2,5 uM CytD o 0,7 uM Jpk y se infectaron con RNV. Los sobrenadantes se titularon por placas de lisis (UFP/ml) y las monocapas se procesaron para inmunofluorescencia. Se calculó en porcentaje de infección para cada condición.
En primer lugar, se observó que la infección con RNV afecta drásticamente la morfología celular acompañado de cambios en la organización del citoesqueleto de actina. En segundo lugar, en los cultivos tratados con Cyt D o con JpK, no se observaron diferencias significativas en unidades formadoras de placas (UFP/ml) y en el porcentaje de células infectadas, respecto a sus controles.
En conclusión, nuestros resultados indican que la disrupción del citoesqueleto de actina no afecta la entrada viral, sugiriendo que la internalización del RNV no depende de la macropinocitosis, lo que refuerza que los virus del complejo utilizan la endocitosis dependiente de clatrina para ingresar y proporciona información clave para el desarrollo de estrategias terapéuticas.
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